专利类型： 中国发明申请

专利权人： 河北省农林科学院粮油作物研究所

发明人： 张孟臣;娜仁;杨春燕;闫龙;史晓蕾;邸锐;赵鑫;冯燕

专利号： CN201610700818.3

摘要： 本发明公开了入门载体pAmpGate和pGentGate的构建及使用方法。本发明所提供的入门载体为含有DNA片段A的环形载体；所述DNA片段A自5’端到3’端依次含有attL1序列、IIs型限制性内切酶A的识别序列、IIs型限制性内切酶B的识别序列、筛选标签序列1、所述IIs型限制性内切酶B的识别序列、所述IIs型限制性内切酶A的识别序列、attL2序列。本发明所提供的入门载体可采用Golden Gate构建方法取代传统的BP反应进行入门克隆的构建，由经济实惠的IIS型限制性核酸内切酶和DNA连接酶取代昂贵的BP酶，大大节省了实验费用，同时该入门载体既可以用来进行单片段DNA重组克隆，又可以进行多片段高效“无逢”拼接，在实际研究中非常经济便捷。