专利类型： 中国发明申请

专利权人： 浙江大学;浙江省农业科学院

发明人： 陈华海;尹业师;王欣;项春生

专利号： CN201610579365.3

摘要： 本发明公开了一套检测小鼠肠道分节丝状菌SFB鞭毛蛋白的方法与应用，包括PCR方法、蛋白质变性电泳与免疫印迹方法(SDS‑PAGE‑Western blotting)、细菌原位杂交结合免疫组化方法(FISH+IHC)。所述PCR方法为，设计合成了一对能特异性扩增SFB鞭毛蛋白Flic3基因的引物，使用该引物对样品DNA进行PCR扩增后，可以在凝胶电泳后检测到与Flic3基因片段大小一致的DNA条带。所述蛋白质变性电泳与免疫印迹方法为，成功制备了兔抗SFB Flic3鞭毛蛋白的多克隆抗体，并可以使用该蛋白对样品中是否存在SFB Flic3鞭毛蛋白进行检测。所述细菌原位杂交结合免疫组化方法为使用SFB16S rRNA基因特异常性探针和兔抗SFB Flic3鞭毛蛋白多克隆抗体检测SFB鞭毛蛋白的表达情况、SFB细菌的形态及SFB与肠上皮的相互作用情况。本发明所涉及的检测方法具有快速、直观和表象的优点。