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一种构建真核生物cDNA文库的方法及其专用引物

专利类型： 中国发明申请

专利权人： 浙江省农业科学院

发明人： 宋雪梅;蒋永清;燕飞;陈剑平;姜俊芳

专利号： CN201010277702.6

摘要： 本发明公开了一种构建真核生物cDNA文库的方法及其专用引物，属于基因工程技术领域。专用引物共有两对，一对为序列表中的3RRT和5RRT；另一对为序列表中的3AP和5AP。方法包括：1)以总RNA为模板，以序列表中的3RRT和5RRT为引物合成第一链cDNA；2)以序列表中的3AP和5AP合成双链cDNA；3)经琼脂糖凝胶电泳去除合成不完全的小片段产物后，将双链cDNA与pCR-XL-TOPO长片段PCR克隆载体重组连接，再将连接产物转化宿主大肠杆菌XL-Gold感受态细胞，即完成cDNA文库的构建。本发明可普遍用于mRNA具有polyA尾端的真核生物样品的cDNA文库构建。

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