专利类型: 中国发明申请
专利权人: 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所
发明人: 张欣;彭军;张贺;蒲金基;谢艺贤;漆艳香
专利号: CN201310547550.0
摘要: 本发明公开了一种热带植物多糖多酚小RNA提取方法,该热带植物多糖多酚小RNA提取方法包括以下步骤:采样热带植物叶片,冻入液氮,‑80℃保存;准备小RNA提取的试剂,CTAB裂解缓冲液、PEG8000沉淀缓冲液、EDC交联缓冲液、miRNA Northern blotting杂交缓冲液、7%dPAGE、Washing Buffer;按照小RNA提取的预处理、Trizol抽提、分级沉淀高分子量RNA、沉淀小RNA,提取小RNA;按照17%dPAGE分离、转膜及交联、miRNA杂交及洗膜、小RNA杂交及洗膜、曝光及保存,实现RNA杂交;miRNA stem‑loop RT‑PCR扩增;开展多糖多酚植物小RNA的提取以及检测分析。本发明克服了目前植物小RNA提取方法的不足,具有快速、稳定、操作简便的特点,可以针对miRNA和siRNA进行快速提取和检测分析,具有广泛的应用前景。
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