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一种热带植物多糖多酚小RNA提取方法

专利类型： 中国发明申请

专利权人： 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所

发明人： 张欣;彭军;张贺;蒲金基;谢艺贤;漆艳香

专利号： CN201310547550.0

摘要： 本发明公开了一种热带植物多糖多酚小RNA提取方法，该热带植物多糖多酚小RNA提取方法包括以下步骤：采样热带植物叶片，冻入液氮，‑80℃保存；准备小RNA提取的试剂，CTAB裂解缓冲液、PEG8000沉淀缓冲液、EDC交联缓冲液、miRNA Northern blotting杂交缓冲液、7%dPAGE、Washing Buffer；按照小RNA提取的预处理、Trizol抽提、分级沉淀高分子量RNA、沉淀小RNA，提取小RNA；按照17%dPAGE分离、转膜及交联、miRNA杂交及洗膜、小RNA杂交及洗膜、曝光及保存，实现RNA杂交；miRNA stem‑loop RT‑PCR扩增；开展多糖多酚植物小RNA的提取以及检测分析。本发明克服了目前植物小RNA提取方法的不足，具有快速、稳定、操作简便的特点，可以针对miRNA和siRNA进行快速提取和检测分析，具有广泛的应用前景。

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