文献类型： 获奖成果
获奖名称： 科学技术奖
获奖等级： 一等奖
关键词： 鼻炎;鸡传染性鼻炎;技术;传染性;传染性鼻炎;诊断技术;诊断;鸡;传染;研究与应用;研究;鼻
第一完成单位： 北京市农林科学院畜牧兽医研究所
获奖时间： 2005
摘要： 鸡传染性鼻炎ELISA和PCR诊断技术的研究与应用，属于畜牧兽医科学应用基础学科，适用于世界各国。鸡传染性鼻炎ELISA技术的研究（市自然科学基金项目59202002）、中澳两国鸡传染性鼻炎诊断和防制改进技术的研究（ACIAR项目PN9205）、鸡传染性鼻炎诊断试剂盒的研究（市科委项目951502000）和鸡传染性鼻炎高新诊断技术用于流行病学调查的研究（农业部95－牧－02－03－08）。 主要研究内容：①间接ELISA方法的建立（抗原处理，抗原、血清和二抗工作浓度等的测定），特异性、敏感性和可重复性的研究。②阻断ELISA方法的建立（抗原制备，抗原、血清、单抗和辣根过氧化物酶标记抗体的工作浓度测定等），型特异性、敏感性和可重复性的研究。③阻断ELISA试剂盒的研究（型特异性、敏感性、批间可重复性、保存期和临床应用等）。④PCR方法的建立（引物设计、反应条件、特异性、敏感性和临床应用的研究）。⑤PCR试剂盒的研究（特异性、敏感性、可重复性、保存时间和对临床样品的检验等）。⑥用ELISA和PCR进行IC流行病学调查。 解决的技术问题：解决了传统诊断方法很难区分血清型，特异性差、敏感性低、可重复性差和确诊困难（确诊需要6－7天）等问题。 特点：所建立的方法特异性高达100％、阳性检出率高于传统方法、可重复性好、确诊仅需6－7小时，具有快速、敏感、特异、方便等特点。创新点：将单克隆抗体和分子生物学技术应用到IC的诊断，使IC的诊断水平上了一个新的台阶。间接ELISA为国内领先，阻断ELISA和PCR具有国际先进水平。阻断ELISA的特异性为100%，比传统的血清学方法敏感、特异，可重复性好；其试剂盒在-20℃可保存24个月以上。PCR的特异性为100%，敏感性为可测出1Pg的DNA，对可疑病料的检出率是细菌分离方法的2-3倍，可重复性好，其试剂盒在-20℃可保存至少15个月。 推广应用等：利用所建立的方法对500多份病料和2191份血清进行了检测，表明我国存在由A、C型Hpg引起的IC，并于2002年首次报道我国有B型Hpg引起的IC。在北京、山东等地有关单位进行了PCR和阻断ELISA试剂盒的区域试验，表明两个试剂盒特异性强，使用方便，易操作。农业部于2002年将间接ELISA、阻断ELISA和PCR列为国家行业标准。澳大利亚IC国际参考实验室，用所建立的方法检测哥伦比亚、厄瓜多尔和美国等10多个国家的多个分离株和几百份血清；培训了南非、墨西哥、美国和秘鲁等10个国家的12位科学家。PCR已被《禽病原分离和鉴定实验手册》、《默克兽医手册》和《禽病》收录。PCR方法被禽病界称为金色标准。在以PCR为主要技术支持下，Hpg现在被更名为Avibacterium paragallinarum。
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