科研产出
橡胶树半胱氨酸蛋白酶基因(HbCP2和HbCP3)的克隆与表达分析
《农业生物技术学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要:半胱氨酸蛋白酶(cysteine proteinase,CP)是参与植物多种生理过程的一类重要的蛋白酶。为探究CP家族基因在橡胶树(Hevea brasiliensis)中的生理作用,本研究从橡胶树胶乳中克隆了两个CP基因的全长cDNA,分别命名为HbCP2(1 245 bp)(GenBank登录号:KF771829)和HbCP3(1 268 bp)(GenBank登录号:KF771830),分别编码约41和40 kD的蛋白质;获得的基因DNA序列全长分别为1 919和1 634 bp,均包含4个外显子和3个内含子;属于木瓜蛋白酶(C1)家族,分别与同属大戟科植物蓖麻(Ricinus communis)(86.86%)及麻风树(Jatropha curas)(84.74%)的一个CP的亲缘关系最近。实时荧光定量PCR分析显示,HbCP2在雄花而HbCP3在胶乳中的表达量最高;HbCP2和HbCP3的表达受割胶、伤害、乙烯利、赤霉素和茉莉酸调控,但不同基因对同一种处理或同一基因对不同处理的反应程度存在较明显差异。研究结果表明,HbCP2可能参与橡胶树的环境胁迫应答和细胞组织衰老过程的调控,而HbCP3可能参与橡胶树的胶乳再生调控以及病害胁迫应答。本研究为橡胶树CP基因家族的研究,探讨CP在橡胶树中对胁迫应答和胶乳再生调控机制提供了相关信息。
关键词: 橡胶树 半胱氨酸蛋白酶 基因克隆 表达分析 生理功能
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艾纳香不同部位提取物的抗氧化活性及其对酪氨酸酶的抑制作用
《中国实验方剂学杂志 》 2014 北大核心
摘要:目的:考察艾纳香不同部位提取物的抗氧化活性及其对酪氨酸酶的抑制作用,筛选具有抗氧化活性及美白作用的有效部位。方法:采用水,50%乙醇及95%乙醇3种不同极性溶剂分别回流提取艾纳香的功能叶、嫩叶、嫩茎;运用DPPH,ABTS,FRAP法及酪氨酸酶抑制活性试验分别比较各部分提取物的相关活性。结果:艾纳香功能叶、嫩叶、嫩茎的95%乙醇提取物DPPH自由基清除率大于其他溶剂提取物,依次为95.38%,91.32%,92.49%;ABTS,FRAP法及酪氨酸酶抑制试验结果显示艾纳香功能叶和嫩叶的50%乙醇和95%乙醇提取物均具有较好的活性,当各提取物质量浓度为1 500 mg·L-1时,艾纳香功能叶的水,50%乙醇和95%乙醇提取物对ABTS自由基的清除率分别为26.54%,82.48%,67.46%,嫩叶的3种提取物分别为34.15%,95.39%,59.59%,嫩茎的3种提取物分别为52.05%,39.35%,38.77%。功能叶的水,50%乙醇及95%乙醇提取物对酪氨酸酶的抑制率分别为24.24%,32.79%,37.97%;嫩叶不同提取物的抑制率分别为27.12%,36.53%,34.19%,嫩茎的则依次为31.36%,26.22%,24.00%。结论:艾纳香提取物具有较好的抗氧化活性和酪氨酸酶抑制作用,其中功能叶和嫩叶为其主要活性部位。
关键词: 艾纳香 抗氧化活性 DPPH自由基 ABTS自由基 铁还原能力 酪氨酸酶抑制作用
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气候变化与我国木薯北移的可能性分析
《中国热带农业 》 2014
摘要:气候变化为农作物种植重新调整提供了机遇。木薯起源于热带美洲,在我国主要分布于南亚热带区域,全球气候变暖为我国木薯北移创造了条件。本文着重对木薯北移进行可行性分析,阐述北移计划实施对促进种植结构调整,加快良种良法步伐,促进农民增收企业增效,减少原料进口依赖程度,最大限度地满足国民经济发展对木薯的需求,保障我国粮食能源安全和加快现代热带农业建设及服务"三农"具有的积极战略意义。
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莠灭净在不同土壤中的淋溶性研究
《农药科学与管理 》 2014
摘要:采用土柱淋溶法分别对莠灭净在不同土壤中的迁移特性进行比较研究。莠灭净在4地土壤中的淋溶速率为安徽萧县>广西武鸣>广西扶绥>广西来宾,莠灭净在4地土壤中R1>50均属于难淋溶型。
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巴西橡胶树红根病病菌液体培养条件优化研究
《热带农业科学 》 2014
摘要:通过设置不同碳源、氮源、温度、菌龄等对巴西橡胶树红根病病菌[Ganoderma pseudoferreum(Wakef)Over.et Steinm]进行液体培养试验。结果表明:适合橡胶树红根病病菌菌丝生长的液体培养基配方为:蔗糖1%,葡萄糖2%,D-果糖2%,玉米粉0.5%,酵母粉0.5%,黄豆粉0.8%,蛋白胨1%,KH2PO40.1%,Mg SO40.1%,VB1 0.02%;最适培养温度是29℃,液体菌种菌龄为120 h,培养周期为240 h。
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槟榔植原体膜蛋白基因的克隆及其抗血清制备
《热带作物学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要:根据实验室测得的槟榔植原体膜蛋白基因(Ac Pmp)序列设计1对特异引物mp-FP/mp-RP,以病样槟榔总DNA为模板扩增该Ac Pmp的编码区并连接到p MD19T simple中间载体。将测序正确的阳性菌提取质粒p MD19T-Ac Pmp,经NcoⅠ和XhoⅠ双酶切后回收Ac Pmp片段,然后以正确的编码框连接到原核表达载体p ET32a(+),转化Escherichia coli BL21感受态细胞。含有p ET32a-Ac Pmp的BL21表达菌经IPTG诱导和SDS-PAGE分析表明,在30℃,0.1 mmol/L IPTG条件下诱导4 h,可产生部分可溶性的融合蛋白。利用Ni2+-NTA亲和层析柱法进行纯化并获得高纯度的可溶性融合蛋白。将纯化后的融合蛋白多次免疫家兔,取其抗血清,以融合蛋白(1∶10 000稀释)作抗原,间接ELISA法测定抗血清效价大于125 000。Western Blot杂交结果表明槟榔植原体膜蛋白抗血清能与融合蛋白特异性结合。
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