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分子生物学方法在鲚属鱼类遗传学研究中的应用

江苏农业科学 2013 北大核心

摘要:对已应用于鲚属鱼类系统发育分析、遗传多样性分析、物种分类和种类判别等遗传学研究的分子生物学方法进行综述,在了解其重要进展的基础上,比较各自的长处和不足,并展望其发展趋势,以期为中国鲚属鱼类系统发育分析、遗传多样性分析、物种分类及种类判别等方面的下一步研究提供借鉴。

关键词: 鲚属 分子生物学方法 物种分类 种类判别 遗传多样性

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魁蚶血细胞分类及其免疫功能的初步分析

水产学报 2013 北大核心 CSCD

摘要:借助显微观察和鳗弧菌免疫刺激等手段,首次对魁蚶血细胞进行分类及免疫功能分析。魁蚶血细胞可分为3大类:红细胞、白细胞和血栓细胞,红细胞发育过程大致经历新生、成熟、衰老和死亡4个阶段。白细胞分为:嗜酸性、嗜中性、嗜碱性细胞,以及淋巴细胞和巨核细胞。嗜酸性、嗜中性、嗜碱性细胞和血栓细胞均参与血液的凝固;红细胞、白细胞均有吞噬病原菌能力,红细胞具有被动吞噬作用和免疫吸附作用,白细胞具有主动吞噬作用,嗜酸性和嗜中性细胞是吞噬病原菌的主体,嗜碱性细胞具有吞噬大颗粒异物的作用,魁蚶感染病原菌后白细胞增多并表现炎症。研究表明,魁蚶血细胞在应对外界的免疫刺激时,能作出系统免疫应答,且血细胞免疫分工明确,以抵御外界不良刺激。

关键词: 魁蚶 血细胞 吞噬作用 血液凝固 免疫

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大鳞鲃幼鱼氨基酸需要量

华中农业大学学报 2013 北大核心 CSCD

摘要:选择体质量为(11.29±0.07)g的健康大鳞鲃,共分2个处理组(蛋白饲料组和无蛋白饲料组),每个处理3个重复,每重复20尾鱼。根据试验前后鱼体氨基酸变化分别得到大鳞鲃日增加氨基酸和日维持氨基酸需要量,并根据两者之和得到氨基酸日需要量。结果表明:1)从大鳞鲃生长状况看,与蛋白饲料组相比,无蛋白饲料组鱼体末质量及特定生长率均显著降低(P<0.05)。2)从体成分变化情况看,与蛋白饲料组相比,无蛋白饲料组鱼体水分含量显著升高(P<0.05)。3)如大鳞鲃饲料蛋白水平为43%,饲料利用率为90%,日投饵率为3%,大鳞鲃氨基酸日需要量为(mg/100g):苯丙氨酸25.54,蛋氨酸15.80,精氨酸36.08,赖氨酸53.76,亮氨酸49.95,苏氨酸25.05,缬氨酸25.99,异亮氨酸25.33,组氨酸19.94;大鳞鲃饲料中氨基酸含量为(g/100g):苯丙氨酸0.85,蛋氨酸0.53,精氨酸1.20,赖氨酸1.79,亮氨酸1.67,苏氨酸0.84,缬氨酸0.87,异亮氨酸0.84,组氨酸0.66。

关键词: 大鳞鲃 幼鱼 氨基酸需要量 鱼饲料

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传染性造血器官坏死病病毒高效RT-PCR检测方法的建立

水生生物学报 2013 北大核心 CSCD

摘要:传染性造血器官坏死病毒(Infectious haematopoietic necrosis virus,IHNV),属弹状病毒科(Rhabdoviridae),诺拉弹状病毒属(Novirhabdovirus),IHNV是该属代表种[1]。IHNV病毒粒子含有一条全长约为11 kb的线状、反义、单股RNA。其基因组从3′端至5′端依次编码6个蛋白:核蛋白(N)、磷蛋白(P或者M1)、基质蛋白(M或者M2)、糖蛋白(G)、非结构蛋白(NV)和聚合酶蛋白(L)[2—4]。传染性造血器官坏死病(Infectious haematopoietic necrosis,IHN)是一种极其严重的鱼类疾病,一旦病毒侵入鱼体进入血液循环后就会繁殖于鱼体的各个器官。IHNV的传染途径分为垂直传播和水平传播,一旦感染,

关键词: 传染性造血器官坏死病毒(IHNV) 聚合酶蛋白 RT-PCR检测

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哲罗鱼胚胎至仔稚幼鱼期主要免疫指标和抗氧化酶的活性变化

淡水渔业 2013 北大核心 CSCD

摘要:为探索哲罗鱼(Hucho taimen)胚胎至仔稚幼鱼期非特异性免疫机制,利用生物化学的方法测定了哲罗鱼胚胎至仔稚幼鱼期体内酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、还原型谷胱甘肽(GSH)、鱼体过氧化反应产物丙二醛(MDA)的水平。结果显示,ACP、AKP和GSH随发育时间的增加先升高后降低并趋于平稳,在受精35 d,即出膜期都出现一个高峰值;SOD和CAT在整个发育期间活性接近于0;MDA含量随时间增加持续升高。表明在哲罗鱼早期发育阶段,鱼体随发育时间的延长受到的过氧化损伤持续加重。

关键词: 哲罗鱼(Hucho taimen) 胚胎 仔稚幼鱼 免疫指标 抗氧化酶

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镧/铝改性沸石的磷释放条件及再生能力研究

农业环境科学学报 2013 北大核心 CSCD

摘要:通过将磷吸收饱和的镧/铝改性沸石分别放入pH为2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0、11.0、12.0、13.0的溶液中,研究了镧/铝改性沸石的最佳磷释放条件,并在最佳磷吸附和最佳磷释放条件下研究了镧/铝改性沸石的再生能力。结果表明,当pH变化在2~13时,镧/铝改性沸石的磷释放量和释放百分比随pH的升高先降低后升高,其中:pH为2和12~13时的磷释放率较高,在76%以上,且pH13时的释放率最大,为98.2%;而pH在3~11时,磷释放率较低,在30%以下,且pH6时的释放率最小,为1.7%。表明强酸或强碱环境有利于镧/铝改性沸石中磷的释放。对镧/铝改性沸石再生能力的研究显示,经过4次再生后,镧/铝改性沸石的磷吸附量和再生能力分别为2.367、2.336、2.312、2.253mg·g-1和96.7%、95.5%、94.5%、92.1%,虽然吸附剂的磷吸附能力随再生次数的增加呈现逐渐降低的趋势,但经过4次再生后,其对磷的吸附能力仍保持在92%以上,表明镧/铝改性沸石具有较好的稳定性和再生能力。

关键词: 镧/铝改性沸石 磷吸附 磷释放 再生能力

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碳酸盐碱度胁迫下鲤鱼氨排泄相关基因的差异表达

生物技术通报 2013 北大核心 CSCD

摘要:鲤鱼(Cyprinus carpio)是我国主要淡水养殖鱼类之一,且具有一定的盐碱耐受性,可以在偏碱水体中存活生长。为了了解其对不同碱度的耐受性,以及在碱胁迫环境下的基因表达变化,以鲤鱼为试验材料,使用一定pH值不同碳酸盐碱度水对其进行胁迫试验。选取鱼类氨排泄相关的候选基因,包括Rhesus血型相关糖蛋白基因(Rhesus blood group-associated glycoprotein,Rh),水通道蛋白基因(Aquaporin,AQP),催乳素基因(Prolactin,PRL),碳酸酐酶基因(Carbonic Anhydrase,CA),Na~+/K~+转运ATP酶基因(Na~+/K~+ transporting ATPase,NKA),钠氢交换体基因(sodium hydrogen exchanger,NHE)采用定量PCR方法检测其在不同碱度下的基因表达情况。结果表明上述基因随着碱度的升高在鳃、肠和肾3个组织中的总体表达水平较淡水对照显著升高,说明鲤鱼在碳酸盐碱胁迫条件下与氨排泄相关基因的表达上调。这些基因具有一定的空间表达差异性,具体结果为:胁迫过程中主要在鳃中表达的基因为AQP3A、PRLRA、NHE7,在肾中表达的基因为PRL,在肠中表达的基因是RHAG、RHBG2、RHCG1。这些基因在碱胁迫环境下的表达变化为解析鱼类体内渗透压调节调控机制具有重要意义。

关键词: 氨排泄 基因表达 碳酸盐碱度 定量PCR

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呋喃西林代谢物在杂交鳢(斑鳢♀×乌鳢♂)体内的残留消除规律研究

华南农业大学学报 2013 北大核心 CSCD

摘要:在模拟养殖条件下,对杂交鳢(斑鳢Channa maculata♀×乌鳢Channa argus♂)体内呋喃西林代谢物氨基脲(Semicarbazide,SEM)的残留及消除规律进行了研究.在(30.5±0.5)℃水温条件下,用质量浓度为2 mg/L呋喃西林药浴杂交鳢苗种2 d.药浴期间于0.5、1、2、4、8、12、24、48 h取样,停止药浴后于0.5、1、2、4、8、12、24、48、96、192、288、384、480、720、960、1 200、1 440、1 920、2 400、2 880 h取样,采用液-质联用(HPLC-MS)方法测定杂交鳢肌肉中SEM的含量.结果显示,药浴期间0.5~48 h,肌肉中SEM质量分数从(32.58±2.82)μg/kg逐渐升高至(175.92±18.49)μg/kg;药浴结束后的SEM质量分数经测定于1 h达到最高,为(108.00±5.86)μg/kg;药浴结束后2~48h,苗种体内SEM质量分数维持在(53.60±4.90)~(69.21±5.71)μg/kg,48 h后显著下降,至60 d后已低于检测限0.25μg/kg.鱼体肌肉中SEM的平均消除速率为0.089μg/(kg.h).结果显示,在该试验条件下,鱼体内SEM可在60 d后代谢消除.

关键词: 呋喃西林 代谢物 杂交鳢 残留 消除

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洛氏鱥形态性状对体质量的影响

生态学杂志 2013 北大核心 CSCD

摘要:采用相关分析、通径分析和多元线性回归分析方法,研究了1龄和2龄洛氏鱥形态性状对体质量的影响,为其生长指标提供选择性状。结果表明:1龄组全长、体长、体高和尾柄高4个形态性状与体质量的相关系数分别为0.953、0.958、0.951和0.948,且均达到极显著水平(P<0.01),4个形态性状对体质量的通径系数也达到极显著水平(P<0.01),对体质量的决定程度由大到小依次为体长>全长>体高>尾柄高,4个性状与体质量的相关指数高达0.954,说明所选性状是影响体质量的主要形态性状,拟合方程为Y=-12.375+2.255X2+4.683X3+4.722X8-1.162X1;2龄组经过剔除保留了体长和体高,它们与体质量的相关系数分别为0.939和0.846(P<0.01),2个形态性状对体质量的通径系数也达到极显著水平(P<0.01),对体质量的决定程度为体长>体高,2个性状与体质量的相关指数高达0.912,说明体长和体高是影响体质量的主要形态性状,拟合方程为Y=-188.444+11.416X2+16.304X3。

关键词: 洛氏鱥 形态性状 体质量 通径分析 多元回归

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奥利亚罗非鱼髓样分化因子(MyD88)的克隆及其在组织中的表达

动物学杂志 2013 北大核心 CSCD

摘要:髓样分化因子(myeloid differentiation factor 88,MyD88)是TLR(toll-like receptor)信号通路的关键接头蛋白,在先天性免疫中具有重要作用。通过RACE-RCR技术克隆了奥利亚罗非鱼(Oreochromis aureus)MyD88基因cDNA全长序列(GenBank登录号:JN032017)。序列分析表明,奥利亚罗非鱼MyD88基因全长为1 611 bp,其中包括155 bp的5'非编码区,589 bp的3'非编码区和867 bp的编码区,编码288个氨基酸残基。MyD88蛋白N端具有死亡结构域,C端具有TIR结构域。同源性分析表明,奥利亚罗非鱼MyD88氨基酸序列与鳜鱼(Siniperca chuats)相似性最高,为85.8%,与其他鱼类相似性为70%~82%,与哺乳动物相似性为63%~66%;系统进化树分析表明,奥利亚罗非鱼MyD88与同属鲈形目的鳜鱼、大黄鱼(Larimichthys crocea)聚在一起。采用实时定量PCR方法检测MyD88在奥利亚罗非鱼各组织中的表达情况。结果显示,MyD88在所有被测组织中都有表达,其中表达量最高的是卵巢,其次在小肠、脾、肝、肾、鳃和血液中有较高的表达量,肌肉、精巢组织中表达量最低。本研究可为进一步探讨MyD88在奥利亚罗非鱼TLR信号通路中的作用奠定一定的基础。

关键词: 奥利亚罗非鱼 实时定量PCR MyD88 基因表达

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