科研产出
稻曲病菌T-DNA插入突变体5062的插入位点分析
《中国农业科学 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：[目的]研究稻曲病菌致病力增强的ATMT突变菌株5062,为稻曲病菌致病机制解析、致病相关基因克隆提供方法基础.[方法]测定和观察5062的菌落直径、菌落形态、产孢能力等生物学特性,进一步利用TAIL-PCR和RACE技术克隆5062基因组的T-DNA侧翼基因,并比对分析基因的信息,最后利用RT-PCR检测突变基因的表达量.[结果]与野生型菌株相比,突变菌株5062田间接种表现为致病力增强,在MM和水琼脂培养基上生长速率减慢,产生大量分生孢子,而在PSA和TB3培养基上,其菌落形态、色素等方面与野生型无明显差异.TAIL-PCR扩增得到的紧邻T-DNA两侧的侧翼序列在野生型中不相邻.TAIL-PCR结合RACE技术克隆了5062基因组的T-DNA侧翼基因,RT-PCR表明T-DNA插入位点右侧1个基因在突变体中上调表达.[结论]突变菌株5062的致病力增强,在营养贫乏条件下产孢能力增强,其表型的变化可能是染色体重排和T-DNA插入共同影响的结果.
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滨海滩涂盐碱地甜高粱生长和地上部干物质积累特性的研究
《中国农学通报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：明确不同密肥水平下滨海滩涂盐碱地甜高粱生长特性、干物质积累特征,为盐碱地甜高粱高产栽培提供理论基础。以甜高粱ST008为试验材料,采用二因素随机区组设计,研究不同种植密度及氮肥用量水平对盐碱地甜高粱农艺性状、产量及茎秆糖锤度的影响;利用通径分析,对甜高粱不同生育阶段干物质积累与生物产量、糖锤度之间的相互关系进行了相关性分析。甜高粱ST008在种植密度120000株/hm2、氮肥用量300kg/hm2条件下获得的生物产量、籽粒产量和茎秆含糖量较高,株高、叶片数、茎粗等较为适宜。通径分析表明,拔节至抽穗期地上部干物积累量和生物产量、茎秆含糖锤度之间呈极显著的正相关关系,对提高生物产量、茎秆糖锤度的贡献最大。盐碱地甜高粱在密度120000株/hm2、施氮量300kg/hm2水平下生物产量最高。提高拔节至抽穗阶段甜高粱植株的光合生产是提高甜高粱产量、含糖量的关键。
关键词： 甜高粱 种植密度 施氮量 生长特征 地上部干物质积累
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结球甘蓝遗传多样性的SSR分析
《江苏农业学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：利用62对SSR引物对36个结球甘蓝种质材料进行了遗传多样性分析.结果表明,有40对SSR引物在36个种质材料间表现为多态性.共检测到146个等位基因位点,每对引物的等位基因位点变幅为2-7个,平均为3.65个,有效等位基因数为127.88个,平均为3.20个.每个SSR位点的多态信息量(PIC)变化范围为0.182-0.832,平均为0.644.36个种质材料问遗传相似系数变幅为0.473~0.815,平均为0.720.UPGMA聚类分析结果显示,在相似系数为0.62的水平上可将36个甘蓝种质材料聚为三大类群,利用SSR分子标记可以从DNA水平上进行结球甘蓝遗传多样性分析.
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大棚苦瓜叶菜立体高效栽培新模式
《上海蔬菜 》 2013
摘要：蔬菜立体栽培就是根据不同地区的自然环境条件和各种蔬菜对环境条件的要求,充分利用生育期长短的时间差、植株高矮的空间差以及对土壤营养、湿度、光照、水分要求不同的环境差进行间套作,形成合理的分层的复合立体结构,最大限度地发挥土地和作物的生产潜力,同一时间内,在单位面积上获得更多的农产品。大棚苦瓜叶菜(苦瓜和叶用萝卜、青菜、苗用大白菜、香菜、苋菜)立体高效栽培在春夏
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生防菌Bs916合成脂肽抗生素泛革素的操纵子结构功能及生物活性
《中国农业科学 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：【目的】明确枯草芽胞杆菌Bs916(Bacillus subtilis 916)分泌的脂肽化合物Fengycin操纵子的结构、功能和生物活性,阐明枯草芽孢杆菌Bs916防治真菌病害的分子作用机制。【方法】在Bs916全基因组测序基础上,采用LA-PCR方法克隆Fengycin的操纵子Fen;通过生物信息学方法分析Fen操纵子的遗传特征;运用基质辅助解离质谱法测定Fen操纵子合成的脂肽类化合物中同系物的分子量;采用同源重组方法构建Fengycin突变株BSFG;通过抑菌活性和溶血活性试验测定突变株BSFG的生物活性。【结果】克隆到Bs916基因组DNA中全长约37.67 kb的Fen操纵子,含有5个开放阅读框架分别编码FenA、FenB、FenC、FenD和FenE多功能复合酶;与Bs168对应Fen操纵子的同源性为65%。根据该操纵子特征推测其编码的脂肽类化合物为Fengycin;Fen操纵子负责合成的Fengycin包含5个变异体,分属于两类不同同系物。同系物1的质子化峰分子量分别为1 449.8、1 463.9、1 477.9;属于相差1个(-CH2)亚甲基的同系物,一级结构为[cyclo-([cyclo-(Glu-Orn-Tyr-Thr-Glu-Ala-Pro-GlnTyr-β-amino fatty acid)];同系物2的质子化峰分子量分别为1 491.9和1 505.9,也属于相差1个(-CH2)亚甲基的同系物,相对于同系物1其第6位的Ala氨酸残基变为Val氨酸残基。生物活性测定结果表明突变株BSFG抗菌活性相对于野生型菌株Bs916得到显著下降,但溶血活性的变化不明显。【结论】本研究克隆了生防菌Bs916中合成Fengycin的完整操纵子,通过对操纵子生物信息学分析和生化试验鉴定了Fengycin的5种变异体的化学结构,并阐明了脂肽Fengycin是Bs916抗真菌活性的重要因子之一。
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甘蓝型油菜丙酮酸激酶基因RNA 干扰载体的构建
《江苏农业学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：采用基因芯片技术,从油菜中鉴定了一个油分积累优势表达基因即丙酮酸激酶(Pyruvate kinase, PK)基因.为构建甘蓝型油菜PK 基因的RNA 干扰(RNAi)载体,通过设计引物克隆了PK 基因长498 bp 的siRNA 靶序列,连接到pEASY鄄T1 载体上,采用Not I 和Xho I 酶切,酶切产物连接到RNAi 平台载体pHurricane 的Not I 和Xho I 位点,通过多重PCR 鉴定证实载体构建成功,然后将上述PK 基因反向重复框克隆到加入napin 启动子的pCAMBIA1390 表达载体相应的酶切位点上,构建具有种子特异性表达的PK 基因的RNAi 载体.限制性内切酶酶切证实载体构建成功,为进一步研究PK 基因参与决定油菜油分积累的分子机理和代谢调控奠定了基础.
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甘蓝型油菜叶片SPAD值与叶绿素含量及经济产量性状的相关分析(英文)
《Agricultural Science & Technology 》 2013
摘要：[目的]比较甘蓝型冬油菜品种的SPAD值、叶绿素含量、农艺性状、经济性状及产量性状之间差异,分析SPAD值与其它指标的相关性,构建线性回归方程。[方法]以34个甘蓝型冬油菜品种为材料,测定它们的SPAD值,叶绿素含量,农艺性状、经济性状及产量性状,根据相关性显著水平,构建线性回归方程。[结果]34个品种的SPAD值、叶绿素含量、农艺性状、经济性状及产量间的差异均达极显著水平;SPAD值与叶绿素a(chl-a),叶绿素b(chl-b),总叶绿素(chl-z)和类胡萝卜含量(chl-x)相关性达到极显著水平,相关程度依次为chl-b>chl-z>chl-a>chl-x;SPAD值与株高,单株总角果数,每角粒数,单株产量和实收产量呈显著正相关,与分枝点高度、有效分枝数,主轴结角密度,角果长度无显著相关。[结论]利用SPAD值和线性回归方程式评估甘蓝型油菜叶绿素含量、经济性状和籽粒产量是一种简单快捷的方法。
关键词： 甘蓝型油菜 SPAD值 叶绿素含量 经济产量 相关分析
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茶树根系内生真菌与根际土壤真菌的季节多样性分析
《南京农业大学学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：从不同季节的茶树根系和根际土壤中分离得到真菌2 019株,包括茶树根系内生真菌826株、根际土壤真菌1 193株。采用分子生物学鉴定方法,对rDNA-ITS区段进行扩增及分析,共鉴定出13个属28种真菌,其中茶树根系内生真菌12种,根际土壤真菌20种。对不同季节分离得到的真菌进行多样性分析,结果表明:春、夏、秋季分离出茶树根系内生真菌种类分别为12、11、12;3个季节Shannon-Wiener多样性指数差异不明显;而均匀度指数夏季最高,秋季次之,春季最低。春、夏、秋季分离出根际土壤真菌种类分别为18、17、20;3个季节Shannon-Wiener多样性指数及均匀度指数差异均不明显。根际土壤真菌与根系内生真菌比较,春、秋两季Shannon-Wiener多样性指数和均匀度指数差异明显且根际土壤真菌高于根系内生真菌;夏季两者差异均不明显。
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桃品种特异性荧光SSR分子标记数据库构建
《果树学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：【目的】选择通用的荧光SSR分子标记建立桃种质资源基因型数据库便于进行种质特异性鉴定、资源交换、管理和利用。【方法】根据48个SSR标记对国内外669份桃品系的遗传多样性测试结果,从中选择出一部分多态信息含量较高、适合品种鉴别的标记,采用不同荧光标识组合在ABI 3130测序仪测试,为了使不同批次的测试结果准确可靠,6~8个参照品种纳入每次的测试中。【结果】用16个SSR标记基本可以判断品种的特异性,它们可以用4种荧光标识进行标记,便于分为4组在ABI遗传分析仪上测试。目前数据库包含641份材料,基因型一致的品系多为同一品种突变体和自交系演化的地方品种。文中列出了100份中国代表性种质资源分子标记数据库,并建议8个中国品系为参照。对17个桃品种进行系谱验证发现,我国资源圃所育成的7个品种系谱信息正确,但日本桃品种系谱信息与文献出现偏差。【结论】应用16个多态性高的SSR荧光标记可以构建精确的桃品种分子指纹数据库,测试方法及结果对品种特异性和系谱鉴定提供重要的参考,推动资源分子指纹数据库标准化建设工作。
