科研产出
烟草PR1a基因启动子的克隆及其活性检测
《西北农林科技大学学报(自然科学版) 》 2011 北大核心 CSCD
摘要:【目的】从烟草中克隆得到病程相关蛋白1a基因的启动子PR1aP,并对其进行活性检测。【方法】通过PCR方法,从烟草基因组中克隆病程相关蛋白1a基因的启动子PR1aP,构建该启动子驱动的可溶性绿色荧光蛋白基因(smGFP)的植物表达载体p3300-PR1aP-GFP,并用农杆菌介导法将其导入烟草,检测转基因烟草植株经水杨酸(SA)诱导前后GFP的表达水平,通过SDS-PAGE和ELISA对其在不同诱导条件下GFP的表达情况进行分析。【结果】序列分析表明,PR1aP的长度为1 320 bp,含已报道序列的全部顺式作用元件,如水杨酸相关的W-box、ACGT序列等,也有增强子as-a-like元件及CAAT、TATA等常见应答元件。PCR检测结果显示,成功地获得了转基因植株;荧光检测表明,启动子PR1aP在正常条件下不表现活性,而在水杨酸诱导下有GFP表达。SDS-PAGE和ELISA分析结果表明,当水杨酸诱导时间为72 h、质量浓度为0.25 mg/L时,GFP表达量达到最大值,GFP最高占到总可溶性蛋白的0.083%,产率最高可达15μg/g。【结论】烟草病程相关蛋白1a的启动子PR1aP具有水杨酸诱导性。
关键词: 烟草 病程相关蛋白1a启动子 水杨酸 绿色荧光蛋白
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植物乳杆菌C88胞外多糖生物合成基因的克隆及序列比对
《基因组学与应用生物学 》 2011 北大核心 CSCD
摘要:乳酸菌胞外多糖能显著改善发酵乳制品及食品的流变学和质构特性。为进一步了解乳酸菌胞外多糖的生物合成途径及调控机制,本研究对参与植物乳杆菌C88胞外多糖生物合成基因簇的部分序列进行了克隆和鉴定。根据GenBank中已报道植物乳杆菌基因序列的保守区域设计特异性引物,扩增出植物乳杆菌C88生物合成蛋白基因(cps4A)序列,并通过染色体步移方法克隆了植物乳杆菌C88参与胞外多糖合成基因簇的部分序列(4.9kb)。利用生物信息学方法预测基因簇中6个阅读框的结构和功能,结果表明该序列与已报道的乳酸杆菌胞外多糖生物合成基因具有高度的同源性(>96%);对各阅读框功能预测分析发现,这6个基因主要编码参与胞外多糖合成中的多糖合成蛋白、糖链长度检测蛋白、UDP-葡萄糖-4-异构酶和糖基转移酶。本研究将为利用基因工程方法调控多糖的合成和产量提供理论依据。
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脯氨酸含量与玉米耐盐碱鉴定
《吉林农业科学 》 2011 CSCD
摘要:渗透调节能力是植物抗逆性的最基本特征之一。作为一种重要的渗透调节物质,本文概要介绍了脯氨酸在植物体内的自然分布、生物合成和代谢途径、累积机理、其累积与植物的渗透调节的关系、累积的生理作用以及脯氨酸在玉米耐盐碱种质筛选中的应用等。
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不同凝固剂对豆腐风味的影响
《大豆科学 》 2011 北大核心 CSCD
摘要:采用同时蒸馏萃取法(SDE)提取不同凝固剂制作的豆腐中的挥发性成分,并利用气相色谱—质谱联用法(GC-MS)进行分离鉴定。对所鉴定出的挥发性成分进行比较,结果表明:以CaSO4为凝固剂的豆腐检测出的挥发性成分有28种;以MgCl2为凝固剂的豆腐检测出的挥发性成分有21种;以内酯为凝固剂的豆腐检测出的挥发性成分有24种。其中共有成分18种,以CaSO4为凝固剂的豆腐独有成分为:2-乙基己醇、反式-2-壬烯-1-醇、壬醇、十八烷和正十九烷;以内酯为凝固剂的豆腐独有成分为:1-辛烯-3-醇乙酸酯和己二酸异丁酯。
关键词: 豆腐 挥发性风味 同时蒸馏萃取法 气相色谱—质谱联用法。
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异苞滨藜BADH基因启动子的分离及表达载体的构建
《华北农学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要:为了进一步提高转BADH基因植株的胁迫抗性,分离强胁迫诱导型启动子,以生长在新疆北部干旱沙漠地带的异苞滨藜(Atriplex micrantha)为研究对象,依据已经克隆的BADH基因cDNA序列,参照陈柏君等的方法,分离到长为1 509 bp的5'端上游序列(Genebank:HM230828),预测其转录起始位点为T(+1),位于ATG翻译起始位点的上游82 bp处,同时还发现了一段新的内含子序列(260 bp)。经PLACE和PLANT CARE软件分析,发现此序列具有启动子的基本转录元件:TATA盒和CAAT盒,包含多个抗逆调控元件:ABA响应元件(ABRE),水杨酸诱导元件(-58bp),热激(HSE)、低温(LTRE1)、干旱(DRE)、伤害诱导元件(WUN)等。并首次发现许多其他的胁迫诱导元件:铜胁迫元件(Cu)、真菌诱导元件(AM)、糖信号转导元件(Sugar)、厌氧和低二氧化碳调控元件,植物激素响应元件(ARR1)以及多个光调控元件(Light)和转录因子响应元件(WRKY、CBF、MYB),因此,推测分离到一个新的强胁迫诱导型启动子。同时构建了BADH-P-a-3301和BADH-P-b-3301两个植物表达载体。
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酸菜中降胆固醇功能植物乳杆菌的体外筛选
《食品与生物技术学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要:以分离自东北家庭自制酸菜中的9株植物乳杆菌为研究对象,采用邻苯二甲醛法筛选具有降胆固醇功能的乳杆菌,并通过耐酸、耐胆盐及抗生素敏感性实验,分析菌株的益生特性。结果表明,多株植物乳杆菌具有良好的降胆固醇功能,其中菌株S56的脱除胆固醇的量最高,达到22.40μg/mL。实验菌株均能耐受pH 3.0的酸度和10 g/L的牛胆盐。其中菌株S2-6、S2-5、S4-1和S56在pH 2.0的环境中能保持生长1 h,具有较强的耐酸性。
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秧龄和密度对水稻的产量影响及其数学模拟
《吉林农业科学 》 2011 CSCD
摘要:试验采用二次通用旋转组合设计,用较少次数试验实现对较多水平的考察,主要研究水稻秧苗移栽时期和移栽密度对水稻产量的影响及其构成因素对产量的影响程度。分析了产量构成因子对产量影响的差异,建立了水稻品种98-122产量与秧龄和密度的二次回归模型。根据回归模型求出了获得最高产量时,秧龄和密度的取值。
关键词: 水稻 秧龄 密度 产量 二次通用旋转组合设计
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