科研产出
禽腺病毒4型鞭毛重组蛋白的原核表达及其免疫效果研究
《中国兽医杂志 》 2017 北大核心
摘要：为研究禽腺病毒4型重组鞭毛-fiber2蛋白免疫保护性,将鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白基因与禽腺病毒4型的fiber2基因融合,再将融合基因和单独的fiber2基因分别克隆到原核表达载体p ET-28a,后将构建的p ET-28a-flagellin-fiber2和p ET-28a-fiber2重组载体分别转入大肠杆菌BL21细胞,经IPTG诱导表达,利用SDS-PAGE和Western Blot鉴定表达产物,再将表达产物纯化后免疫21日龄SPF鸡;结果表明,重组菌在37℃培养条件下1.0 mmol/L的IPTG诱导6 h可表达最多的可溶性重组蛋白,Western Blot分析表明,所表达的重组蛋白均能与禽腺病毒血清4型感染阳性血清发生特异性反应,说明所表达蛋白具有良好反应原性,动物试验表明,表达的两种目的蛋白能为鸡提供一定保护力,且低剂量的重组鞭毛-fiber2蛋白产生较好的免疫保护效果。
关键词： 禽腺病毒4型 鞭毛基因 fiber2基因 原核表达 免疫保护
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利用挥发物红外光谱鉴别牛肉变质状态
《光谱学与光谱分析 》 2017 EI SCI 北大核心 CSCD
摘要：牛肉在运输过程中极易受到微生物的感染而变质,对牛肉变质的监测十分重要。我们利用长光程FTIR光谱检测牛肉变质时产生的挥发性物质。证明了牛肉在变质过程中产生的主要挥发性物质是氨气和二氧化碳。并定量分析牛肉变质产生的氨气和二氧化碳的变化规律,以判断牛肉的状态。采用主成分分析法(PCA)实现对挥发性物质的红外光谱分类,进而可以准确的区分新鲜和变质的牛肉。我们采用化学计量学方法软独立建模聚类分析法(SIMCA)和偏最小二乘判别分析(PLS-DA)对特征波段内的光谱进行分类,两种方法具有很好的判断率。结果表明长光程FTIR结合化学计量学方法能够区分新鲜和变质的牛肉。
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营养液中添加不同植物生长调节剂对夏季番茄幼苗生长发育的影响
《北方园艺 》 2017 北大核心
摘要：无基质营养液育苗是一种新的育苗技术。幼苗的整个苗期都生长在营养液中,控制幼苗徒长,特别是在夏季培育出壮苗是一个亟待解决的技术问题。现以‘硬粉8号’番茄为试材,采用在营养液中添加一定量的多效唑、矮壮素和缩节胺来控制植株的长势。结果表明:在营养液中分别添加1、2mg·kg~(-1)多效唑,20、25mg·kg~(-1)矮壮素,10、20mg·kg~(-1)缩节胺均能有效控制植株的长势;在营养液中添加20、25mg·kg~(-1)矮壮素,10、20mg·kg~(-1)缩节胺的壮苗指数为0.028 4、0.032 5、0.051 1和0.036 5,分别比对照增加了9.2%、25.0%、96.5%和40.4%;说明在营养液中添加20、25mg·kg~(-1)矮壮素,10、20mg·kg~(-1)缩节胺能有效控制植株徒长,提高壮苗指数;3种生长抑制剂对徒长抑制强度和作用时间明显不同。在夏季使用无基质营养液育苗系统育苗,可在营养液中添加10mg·kg~(-1)缩节胺和25mg·kg~(-1)矮壮素。
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鸡新城疫-传染性法氏囊病-禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗的研究
《中国家禽 》 2017 北大核心
摘要：为研制鸡新城疫(ND)-传染性法氏囊病(IBD)-禽流感(AI,H9亚型)三联灭活疫苗,用新城疫病毒(NDV)La Sota株及H9亚型禽流感病毒(AIV)WD株分别接种易感鸡胚培养,用传染性法氏囊病病毒(IBDV)BJQ902株接种DF-1细胞培养,收获病毒液,经超滤浓缩、甲醛灭活后,加入油佐剂乳化制成3批疫苗。对3批制品进行了检验,其性状检验、装量检查、无菌检验、甲醛、汞类防腐剂残留量测定均符合要求,鸡对疫苗无任何不良反应。效力检验结果显示:ND部分以20μL/只剂量免疫,血凝抑制(HI)效价达5.6~6.1 log_2,攻毒后均能提供100%保护;IBD部分以0.5 mL/只剂量免疫,中和抗体效价达16.0~16.4 log_2,攻毒后均能提供100%保护;AI(H9亚型)部分以0.3 mL/只剂量免疫,HI效价达8.7~9.0 log_2,攻毒后均能提供100%保护。试验结果证实,研制的疫苗安全、免疫效力高。
关键词： 鸡新城疫 传染性法氏囊病 H9亚型禽流感 三联灭活疫苗
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白菜叶片表皮蜡粉成分及合成相关基因表达分析
《中国蔬菜 》 2017 北大核心
摘要：为了解白菜叶片表皮蜡粉晶体结构形态、成分及合成,以有蜡粉的R-o-18和无蜡粉的15E-545-2为试材,利用扫描电镜观察成熟期新鲜叶片表皮的晶体结构;采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)分析二者在蜡粉成分上的差别,以峰面积为指标,定量计算蜡粉组分含量。结果表明:5 000×下R-o-18上下表皮的蜡粉晶体均呈致密的面包屑状,大小约为10μm;15E-545-2则没有观察到类似结构。GC-MS分析结果表明,R-o-18成熟期叶片表皮蜡粉成分中含酮类2种,占表皮蜡粉提取物的1.02%;醇类4种,占8.33%;烷烃10种,占55.09%;酯类2种,占26.34%。15E-545-2中检测到酮类1种,占3.83%;醇类3种,占9.17%;脂肪酸4种,占23.29%;烷烃1种,占9.32%。蜡粉合成途径Bra034583、Bra018412、Bra032670、Bra027907、Bra027906、Bra027904、Bra027902基因在两个材料中都呈先升后降的表达趋势;且蜡粉性状显现期在R-o-18中的表达均高于15E-545-2,初步证明此7个基因是与白菜叶片表皮蜡粉合成相关的基因。
关键词： 白菜 表皮蜡粉 气相色谱-质谱联用 电镜扫描 RT-PCR
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牛传染性鼻气管炎gB基因TaqMan探针及SYBR Green 1荧光定量PCR方法的建立与比较
《中国兽医杂志 》 2017 北大核心
摘要：为建立牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)荧光定量PCR检测方法,本研究利用IBRV g B基因序列设计引物及相应探针,分别建立Taq Man探针与SYBR Green 1荧光定量PCR方法,并对两种方法的敏感性等综合比较。结果显示,SYBR Green 1荧光定量PCR方法的相关系数(R2)为0.998,扩增效率(E)为95.7%;Taq Man探针荧光定量PCR方法的R2为0.999,E为108.3%;两种方法的敏感性均为0.2 TCID50,变异系数均小于3%。综合结果显示,两种检测方法无显著差异。最后,本研究成功建立了检测IBRV的荧光定量PCR,将为IBRV的临床检测提供方法。
关键词： 牛传染性鼻气管炎病毒 TaqMan探针荧光定量PCR SYBR Green 1荧光定量PCR 临床检测
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玉米InDel标记20重PCR检测体系的建立
《作物学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：为构建玉米多重PCR检测体系,提高分子标记检测效率,利用10份代表性玉米材料对238对InDel引物进行单重PCR评估,共得到192对扩增效率高、稳定性好的引物。根据软件评估结果、扩增质量、产物范围、染色体均匀分布原则从192对引物中优选出30对综合表现较好的引物形成扩增产物范围在80~200 bp和200~400 bp的两组核心引物组合,每套组合中有10对引物分布在不同染色体上。在核心引物组合的基础上综合考虑染色体分布、碱基片段范围、引物荧光颜色,逐一添加引物,最终形成两组玉米20重PCR体系,一组40重荧光标记毛细管电泳。
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利用微滴式数字PCR技术分析转基因玉米抗除草剂标记基因EPSP拷贝数
《华北农学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：基于微滴式数字PCR(Droplet digital PCR,ddPCR)平台,以转基因玉米为例,建立了转基因作物(Genetically modified crops,GM crops)外源基因拷贝数分析方法,对待测样品进行了快速鉴定,并从T_0转基因玉米株系中鉴定出多个单拷贝单株。对该方法与实时荧光定量PCR(Quantitative real-time PCR,qRT-PCR)方法在分析结果的准确性方面进行了比较,从试验数据可以看出,2种检测方法的结果比较一致,单拷贝检测结果高度一致;但是ddPCR试验操作更加简便,试验结果可重复性强,试验数据更加准确可靠。研究表明,ddPCR方法是一种更加便捷、快速和准确的外源基因拷贝数分析新方法,基于其在准确性和灵敏度方面的显著优势,将会在转基因作物的外源基因拷贝数分析中得到广泛的应用。
关键词： 微滴式数字PCR 转基因玉米 外源基因 拷贝数 绝对定量
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基于物联网的寒地玉米大斑病预警系统的设计与实现
《中国农机化学报 》 2016 北大核心
摘要：病虫害的预测、预警,是保障粮食作物生产安全的关键技术,为克服传统的人工观测预报方式存在信息不准确、数据延迟等问题,设计基于物联网技术的寒地玉米大斑病预警系统。系统在ASP.NET平台下,通过WCF服务读取监测数据,采用Silverlight技术设计用户交互界面,调用ArcGIS的GP服务获取预警结果。应用实践表明,农田传感器监测网络获取的作物生长环境数据实时、准确,大斑病预测预警模型针对性强、实用可靠,预警结果简单直观,能够在一定程度上对寒地玉米生产起到辅助决策作用。
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