牛传染性鼻气管炎gB基因TaqMan探针及SYBR Green 1荧光定量PCR方法的建立与比较

张喜喜; 许健; 李永清; 周双海; 《中国兽医杂志 》 2017 北大核心

摘要：为建立牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)荧光定量PCR检测方法,本研究利用IBRV g B基因序列设计引物及相应探针,分别建立Taq Man探针与SYBR Green 1荧光定量PCR方法,并对两种方法的敏感性等综合比较。结果显示,SYBR Green 1荧光定量PCR方法的相关系数(R2)为0.998,扩增效率(E)为95.7%;Taq Man探针荧光定量PCR方法的R2为0.999,E为108.3%;两种方法的敏感性均为0.2 TCID50,变异系数均小于3%。综合结果显示,两种检测方法无显著差异。最后,本研究成功建立了检测IBRV的荧光定量PCR,将为IBRV的临床检测提供方法。

关键词： 牛传染性鼻气管炎病毒 TaqMan探针荧光定量PCR SYBR Green 1荧光定量PCR 临床检测

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玉米InDel标记20重PCR检测体系的建立

冯博; 许理文; 王凤格; 薛宁宁; 刘文彬; 易红梅; 田红丽; 吕远大; 赵涵; 金石桥; 张力科; 蔚荣海; 赵久然; 《作物学报 》 2017 北大核心 CSCD

摘要：为构建玉米多重PCR检测体系,提高分子标记检测效率,利用10份代表性玉米材料对238对InDel引物进行单重PCR评估,共得到192对扩增效率高、稳定性好的引物。根据软件评估结果、扩增质量、产物范围、染色体均匀分布原则从192对引物中优选出30对综合表现较好的引物形成扩增产物范围在80~200 bp和200~400 bp的两组核心引物组合,每套组合中有10对引物分布在不同染色体上。在核心引物组合的基础上综合考虑染色体分布、碱基片段范围、引物荧光颜色,逐一添加引物,最终形成两组玉米20重PCR体系,一组40重荧光标记毛细管电泳。

关键词： 玉米 InDel 多重PCR

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利用微滴式数字PCR技术分析转基因玉米抗除草剂标记基因EPSP拷贝数

王犇; 张春; 李向龙; 张中保; 邹华文; 吴忠义; 《华北农学报 》 2017 北大核心 CSCD

摘要：基于微滴式数字PCR(Droplet digital PCR,ddPCR)平台,以转基因玉米为例,建立了转基因作物(Genetically modified crops,GM crops)外源基因拷贝数分析方法,对待测样品进行了快速鉴定,并从T_0转基因玉米株系中鉴定出多个单拷贝单株。对该方法与实时荧光定量PCR(Quantitative real-time PCR,qRT-PCR)方法在分析结果的准确性方面进行了比较,从试验数据可以看出,2种检测方法的结果比较一致,单拷贝检测结果高度一致;但是ddPCR试验操作更加简便,试验结果可重复性强,试验数据更加准确可靠。研究表明,ddPCR方法是一种更加便捷、快速和准确的外源基因拷贝数分析新方法,基于其在准确性和灵敏度方面的显著优势,将会在转基因作物的外源基因拷贝数分析中得到广泛的应用。

关键词： 微滴式数字PCR 转基因玉米 外源基因 拷贝数 绝对定量

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菜保拾零(五) 利用温湿度调控防治黄瓜霜霉病

李明远; 《中国蔬菜 》 2017 北大核心

摘要：利用膜下灌溉、生长期温湿度控制和高温闷棚等温湿度调控的方法来防治黄瓜霜霉病,不仅适用地区广、投入成本少,还可以做到不使用或少使用农药防病。该方法适用于因高湿而流行的多种病害。黄瓜霜霉病可谓黄瓜上的一个十分重要的病害。自1868年被发现以来,至今已近160年的历史。在北京早在1918年就有人报道过,也就是说我们和这个病害"周旋"很长的时间了。但是,至

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菜保拾零(二)--番茄晚疫病的冬季防治

李明远; 《中国蔬菜 》 2017 北大核心

摘要：番茄晚疫病应当说是种老病。20世纪的1976、1977、1979、1980年在北京就有过几次的大发生,一时成为制约番茄产量的重要病害。后来由于大家的重视,特别是瑞毒霉(即:甲霜灵)的出现,使得番茄晚疫病得到了一定程度的控制。但是,该病害并没有绝迹,时不时地还有发生,给番茄产量造成严重的影响。2016年冬2017年春似乎晚疫病又在北京猖獗了起来。不仅我常去的大兴某基地最近有所发生,

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蔬菜冷害及其应对

李明远; 《中国蔬菜 》 2017 北大核心

摘要：开篇的话:2016年的10月,《中国蔬菜》希望我能发表些图文并茂的专栏文章。鉴于我对该杂志的特别感情,我答应了下来。但是,这个专栏名却迟迟没有定下来。大家知道,我在《温室园艺》上有个专栏,叫"李明远断病手迹",目前已登出近80篇,记录了我大部分诊断病害的经历。再写专栏,恐怕应当有所不同。想来想去,我觉得用"菜保拾零"比较合适。"菜保"即蔬菜植保,"拾零"我上"百度"搜索一下,有一条是这样说的:"拾零即为搜集到的零碎的材料,多用作标题。——如有疑问,可继续追问(笔者注:

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菜保拾零(四) 难以应对的蔬菜灰霉病

李明远; 《中国蔬菜 》 2017 北大核心

摘要：蔬菜灰霉病"柔中有刚",难以防治,在蔬菜保护地生产和储运过程中危害越来越严重,应引起植保人员的重视。2017年春节过后,我去了一趟北京大兴区的某蔬菜基地。在基地白技术员的陪同下到蔬菜温室走了一圈,发现灰霉病较多。不仅番茄、茄子、辣椒、黄瓜等果菜有这个病,一些叶菜如生菜、韭菜都有

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值得关注的十字花科腐霉腐烂病

李明远; 《中国蔬菜 》 2017 北大核心

摘要：由一种腐霉(Pythium sp.)引起的腐烂病在多种十字花科蔬菜上早有发现,生产上可以按照腐霉来防治。关于该病原菌的分类地位、病菌的种名,以及该病的发生规律、防治方法,还有待进一步研究。

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菜保拾零(九) 茶黄螨的发生及其防治

李明远; 《中国蔬菜 》 2017 北大核心

摘要：茶黄螨的为害状与辣椒病毒病的症状相似,但仔细观察这两种症状还是有区别的,另外茶黄螨对不同寄主的危害也是有差异的。及早发现是防治的关键。秋天是茶黄螨发生的季节。我第一次见到茶黄螨是在1976年的秋天,在北京四季青公社(目前的四季青乡)巨山大队的茄子上见到的。当时有几株茄子上出现了一种"怪病",紫茄子的茎和果实应当是发亮的紫色(彩色图版1),却变成了无光泽的灰黄色,表面长了一层木栓化的粗皮(彩色图版2);病株上结的茄子个头不小,表面长出了一层木栓化的组织,还有些茄子开裂,长成开花馒头

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基于PLC的颗粒料自动投放装置设计与试验研究

蔡吉晨; 张琳洁; 王秀; 周建军; 《中国农机化学报 》 2016 北大核心

摘要：为实现家禽养殖中的自动化精准饲喂,设计一种基于PLC的颗粒饲料自动投放装置。该装置以PLC为控制核心,以接近开关为位置检测元件,利用电磁铁驱动落料部件的动作,通过触摸屏设定落料时间,实现饲料的自动定量投放。饲料投放试验以原粮混合颗粒饲料为研究对象,试验结果表明:在落料口开口面积不变的情况下,落料平均重量与落料时间呈现出线性关系,为进一步研究家禽的自动变量饲喂装置提供理论基础。

关键词： 家禽 颗粒饲料 自动投放 PLC

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