科研产出
基于芒果果肉颜色的品质检测技术
《热带作物学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：以芒果品种‘贵妃’为试材,利用光谱仪测定L、a、b值,同时测定果实的硬度及糖酸度,采用偏最小二乘法(PLS)建立基于颜色值的可溶性固形物(SSC)、硬度及可滴定酸(TA)的品质预测模型。预测模型的建模相关系数R可溶性固形物含量、硬度及可滴定酸含量分别为0.962 2、0.946 4和0.959 2;均方误差分别为0.658 1%、0.992 7 kg/cm~2及0.827 5 g/L。预测集拟合方程的相关系数分别为0.965 6、0.949 0和0.925 7;均方误差分别为0.626 7%、1.159 0 kg/cm~2和0.999 2 g/L。结果表明:芒果预测模型的预测准确度,可溶性固形物高于硬度和可滴定酸,基于‘贵妃’芒果采后品质的果肉颜色值快速检测可行。
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巴西橡胶树WRKY转录因子基因HbWRKY41的克隆与表达分析
《华北农学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：为阐明巴西橡胶树WRKY转录因子基因Hb WRKY41的分子特征及表达特性,利用RT-PCR方法从巴西橡胶树中克隆了该基因。Hb WRKY41开放阅读框1 020 bp,编码339个氨基酸,预测蛋白分子量为38.48 k Da,理论等电点为5.52。Hb WRKY41含有1个WRKY保守结构域和1个C_2HC型锌指结构,与蓖麻、棉花、大豆及拟南芥WRKY41蛋白聚为一类,属于Ⅲ类WRKY转录因子家族成员。实时荧光定量PCR检测结果表明,Hb WRKY41在巴西橡胶树根、树皮、胶乳、叶和花等组织中均有表达,以在衰老叶片中的表达最高,而在胶乳和树皮中的表达相对较低。干旱、低温及高盐胁迫均可上调Hb WRKY41的表达,其中以低温或盐胁迫下Hb WRKY41的表达持续升高。Hb WRKY41可能在巴西橡胶树叶片衰老和非生物胁迫应答中起着重要调控作用。
关键词： 巴西橡胶树 WRKY转录因子 基因克隆 表达分析 非生物胁迫
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氯化钠胁迫下模式植物狗尾草种子萌发期抗盐性鉴定与评价指标研究
《热带作物学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：狗尾草是比拟南芥更贴近主要农作物的模式植物,本研究在狗尾草高效遗传转化技术的基础上,以适宜转化的狗尾草ME34品系成熟种子为外植体,根据氯化钠高渗培养基培养法,选择1/2 MS和MS两种基本培养基,分别设计了0、100、200、300、400、500 mmol/L 6个梯度,对狗尾草ME34品系种子萌发期的抗盐性进行了鉴定。实验对各梯度种子萌发率、芽长、根长、鲜重等生长指标进行了测定和统计分析。结果表明:在同一氯化钠梯度下MS基本培养基比1/2 MS基本培养基对狗尾草生长的盐害程度有加重趋势,1/2 MS的基本培养基更能反应狗尾草种子本身对氯化钠的耐盐反应;氯化钠100~200 mmol/L梯度是鉴定狗尾草ME34品系抗盐性的关键梯度,种子萌发期发芽率、鲜重、根长、芽长各项生长指标都受到显著或极显著的影响,4个参数间都极显著正相关;其中鲜重和芽长对氯化钠的胁迫最敏感和直接,可作为该品系种子萌发期抗盐性鉴定的一级指标;种子发芽率对氯化钠胁迫的敏感性仅次于鲜重和芽长,可作为该品系种子萌发期抗盐性鉴定的二级指标;根长对氯化钠胁迫的敏感性稍弱,可作为该品系种子萌发期抗盐性鉴定的三级指标。实验为狗尾草作为抗盐模式植物的研究准备了抗盐性评价指标基础,无论是外源抗盐基因在狗尾草内的过表达,还是内源抗盐基因的敲除,都需要这些具体评价指标的支持。
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木薯钙/CaM调控类受体激酶基因MeCRLK1的克隆及生物信息学分析
《基因组学与应用生物学 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：木薯作为热带亚热带植物对低温非常敏感。为研究木薯对低温敏感的分子机制,我们从低温信号传导途径中的感知方面展开研究。植物类受体激酶作为信号传导途径中的信号接收器,在植物响应低温信号刺激过程中起重要作用。因此本研究利用RT-PCR从木薯栽培种SC8中克隆了一个钙/钙调素调控类受体激酶基因,命名为Me CRLK1(Gen Bank Accession No.KP256022)并进行了系统的生物信息学分析。研究结果表明该基因CDS区为1 296 bp,编码一个431 aa的蛋白。该蛋白的分子式为C_(2118)H_(3391)N_(605)O_(636)S_(18),分子量约为48.08 k D,理论等电点为8.11。该蛋白预测具有多个不同的磷酸化位点,3个Ca M结合位点,4个紊乱区和1个球蛋白区。蛋白结构分析表明该蛋白具有一个跨膜区,一个S_TKc结构域,N末端没有信号肽。预测此蛋白可能亚细胞定位于膜上。Me CRLK1和At CRLK1蛋白序列分析表明,它们的相似性为79.8%,序列一致性为77.6%。二者序列的差异主要位于C末端。该研究结果为进一步验证Me CRLK1基因的功能奠定了基础。
关键词： 木薯钙 钙调素调控类受体激酶 基因克隆
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狗尾草胚性愈伤高效农杆菌转化体系的建立
《热带作物学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：狗尾草是研究C4光合作用的优秀模型,具有热带植物的典型特征,也可作为研究热带作物的重要模型,高效的转基因技术是模式植物广泛服务于科研的基础,目前狗尾草作为模式植物的研究在国外越来越热门,但在国内还没有被关注。但作为模式植物狗尾草现有的转化技术还不完善,转化周期有待缩短,转化效率需要进一步提高。本研究以狗尾草ME34品系不同阶段胚性愈伤为外植体进行农杆菌转化体系研究,通过实验大大提高了狗尾草的转化效率,缩短了转化周期,为狗尾草转基因研究提供了新的技术方法,新方法主要包括以下技术环节:高效胚性愈伤诱导技术,受体胚性愈伤的选择,适宜转化的农杆菌株系及培养条件,浸染和共培养条件与方法,抗性愈伤筛选条件,抗性愈伤成苗条件等。
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野生沉香的鉴别方法
《林业科学 》 2017 EI 北大核心 CSCD
摘要：【目的】建立有效、准确、科学的野生沉香鉴别技术,为沉香的鉴定和品质评价体系建立提供参考依据。【方法】采用醇溶性浸出物含量、显色反应、薄层色谱分析(TLC)和高效液相色谱(HPLC)方法,对10批次野生沉香进行鉴别。【结果】10批次野生沉香的醇溶性浸出物含量整体较高,明显大于《中华人民共和国药典》(2015年版)规定的10.0%;野生沉香的显色反应除呈现人工沉香的樱红色或浅樱红外,还出现紫堇色、浅红色和浅紫色在内的多样性显色,可辅助鉴别野生沉香;薄层色谱操作简单,节省材料,且野生沉香样品在薄层鉴别中呈现清晰的荧光斑点和较好的分离效果,对于大部分野生沉香样品可通过薄层色谱进行基础鉴别;通过相似度评价、峰面积比较,建立10批次野生沉香的HPLC指纹图谱,并确定9个野生沉香共有特征峰,确定野生和人工沉香HPLC特征指纹图谱的差异性。【结论】基于各方法的优势及精准程度,本文提出在显微鉴别的基础上,通过醇溶性浸出物含量、显色反应、薄层色谱分析和HPLC的指纹图谱及特征峰鉴别野生沉香,可为沉香品质评价体系建立提供参考。
关键词： 野生沉香 鉴别方法 高效液相色谱 指纹图谱 共有特征峰
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实时荧光定量检测盐胁迫下香蕉幼苗CaM和Ca~(2+)-ATPase基因的相对表达量
《分子植物育种 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：通过增加外源CaCl_2和钙离子螯合剂EGTA处理后,研究香蕉幼苗在60 mmol/L NaCl人工模拟的盐胁迫0、4 h、8 h、12 h、24 h和48 h不同时间下,测定其叶片和根的CaM和Ca~(2+)-ATPase基因的相对表达量。结果表明,在NaCl胁迫过程中,香蕉幼苗在正常的生长条件下,其根和叶片的CaM基因和Ca~(2+)-ATPase基因均有表达。巴西蕉幼苗根在盐胁迫过程中Ca M基因没有发生显著变化,但是粉蕉根却发生了显著变化,这可能与粉蕉耐盐性高于巴西有关。随着盐胁迫时间的延长,巴西蕉和粉蕉幼苗根的Ca~(2+)-ATPase基因的相对表达量均呈现先上升后下降的趋势。
关键词： 香蕉幼苗 盐胁迫 CaM基因 Ca2+-ATPase基因 荧光定量
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香蕉ACS基因家族的系统进化分析
《分子植物育种 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：ACS是高等植物中乙稀生物合成过程中的关键限速酶,对香蕉果实合成乙烯起到至关重要的作用。目前学界关于对ACS基因家族在香蕉的研究很少,此研究采用生物信息学分析技术,对香蕉ACS基因的理化性质、二级结构预测、亚细胞定位、内含子和外显子结构和保守结构域进行预测与分析,结果表明:编码香蕉ACS的基因有14个,14个MaACS蛋白中有5个偏酸性,9个偏碱性,MaACS基因家族编码的氨基酸的范围在422~684 aa,编码的蛋白相对分子量介于47 244.6~75 564.7 Da之间。所有MaACS蛋白为亲水性蛋白,3个MaACS蛋白为稳定蛋白;香蕉MaACS家族分4个亚家族,基因家族外显子最少含有4个,最多的含有9个外显子。
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木薯MeTPS9基因克隆及表达特性分析
《生物技术通报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：旨在揭示木薯Me TPS9基因在干旱、低温、遮荫等非生物胁迫应答中的作用。用RT-PCR的方法从木薯叶片中克隆Me TPS9基因(Gen Bank登录号:MF276889),用MEGA软件构建系统进化树,用Dna SP软件分析基因结构变异,用Plant CARE分析启动子元件,用荧光定量PCR技术分析Me TPS9在不同组织中以及响应不同非生物胁迫的表达特性。结果显示,从木薯中克隆了一个TPS基因Me TPS9。该基因具有2 598 bp的开放阅读框,编码865个氨基酸,含有TPS家族保守结构域。系统进化树分析表明,Me TPS9与荠菜花和拟南芥中同源基因的亲缘关系较近,序列相似性分别为76.2%和75.6%。基因结构变异发现,木薯野生种和栽培种之间共有66个突变位点,其中11个为错义突变。启动子元件分析表明,Me TPS9含有干旱相关元件MBS、低温相关元件LTR、热胁迫相关元件HSE、以及ABA相关元件ABRE。实时荧光定量PCR分析表明,Me TPS9的表达量在须根中最高,在叶片中最低。而且,Me TPS9基因的表达能被干旱、低温、和遮荫处理显著诱导。Me TPS9在转录水平对木薯干旱、低温、和遮荫胁迫起调控作用,可作为候选基因进一步研究其在木薯抗逆中的作用。
关键词： 木薯 MeTPS9 海藻糖合成酶 结构变异 表达分析 非生物胁迫
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叶施钙肥对芒果果实呼吸、乙烯释放及矿质元素含量的影响
《中国土壤与肥料 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：探索叶面增钙对芒果果实呼吸、乙烯释放及果实矿质元素的影响,为钙肥在芒果生产中的合理应用提供科学理论依据。以"贵妃"芒果为试材,田间试验于2013年10月至2014年6月在海南省东方岛西林场芒果园进行,试验共设置不喷施叶面肥(0 g·L~(-1))、喷施0.5、1.5、2.5、3.5 g·L~(-1)钙含量肥5个处理,各处理3个重复,肥料选择硝酸钙(化学纯)和果蔬钙(Ca 170 g·L~(-1)),于催花前、幼果期、果实膨大期及采收前分别喷施,研究果实呼吸速率、乙烯释放及矿质元素含量变化。研究发现,不施钙处理芒果的果实跃变峰出现在采摘后第13d,叶面增钙使果实跃变峰的出现滞后。在呼吸峰值出现前硝酸钙降低果实呼吸速率,以1.5 g·L~(-1)处理显著降低,峰后有增强呼吸的趋势,在呼吸峰值出现前果蔬钙有提高果实呼吸速率的趋势,峰值出现后有抑制呼吸速率的作用;喷施硝酸钙推迟采后芒果果实进入乙烯跃变期,使跃变峰的出现比CK滞后2 d,峰值过后各处理乙烯释放速率远高于CK,喷施果蔬钙推迟采后芒果果实进入乙烯跃变期,跃变峰的出现有推迟趋势,0.5 g·L~(-1)处理的跃变峰滞后显著,推迟至第17 d;叶施钙肥有使果实K含量降低趋势,以果蔬钙处理显著降低;叶面喷施硝酸钙、果蔬钙均提高果实Ca含量,硝酸钙降低Mg含量,果蔬钙提高Mg含量;叶施硝酸钙使果实Fe、Cu、Zn含量下降,Mn含量提高;叶施果蔬钙使果实Fe下降、Mn提高,低钙提高果实Cu、Zn含量,高钙降低果实Cu、Zn含量。叶面增钙,影响了芒果果实采后呼吸、乙烯释放速率及推迟跃变峰的出现,影响果实部分矿质元素的含量,提高了果实采后贮藏性。
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