科研产出
适用于分子育种的玉米种子无损基因型鉴定技术优化
《分子植物育种 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：随着分子标记技术的快速发展,分子标记辅助育种已被广泛应用于玉米育种,迫切需要高通量、高效的技术方法。基于单粒种子苗前的分子生物学分析来预测表型性状是提高分子标记辅助选择效率的方法,但还需要发展一种切实有效的方法来保证苗前的分子生物学分析和种子播种后的正常发芽及生长。本研究通过对玉米单粒种子进行切取部分胚乳取样,对样品进行CTAB和碱煮法DNA提取的比较,而后对切去部分胚乳的种子进行包衣处理,然后对正常种子(T1)、只切除部分胚乳的种子(T2)、只包衣的种子(T3)以及既切除部分胚乳又包衣的种子(T4)进行室内沙盘发芽试验和田间种植试验分析,结果表明通过包衣的方法可以提高切除部分胚乳种子的发芽率,室内和田间试验中T4处理和T1处理的发芽率、株高及简易活力指数基本相近,差异均不显著。T4处理在室内和田间试验中的发芽率比T2处理分别提高了3.35%和14.90%,差异分别达到显著和极显著水平;T4处理的株高和简易活力指数均比T2处理的高,差异均达到了极显著水平。切除部分胚乳又包衣种子的发芽率高于国家标准发芽率,十天后的株高、简易活力指数基本达到正常种子的水平。对切除部分胚乳的种子包衣的方法可以解决播种前的分子生物学方面的检测又能使种子正常的发芽及生长,大大提高了玉米分子育种效率。
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豆粕提取物对肉仔鸡养分表观代谢率及消化酶活性的影响
《饲料工业 》 2015 北大核心
摘要：文章旨在探讨日粮中添加不同水平豆粕提取物对肉仔鸡养分表观代谢率及肠道消化酶活性的影响。将600只1日龄艾维茵肉仔鸡随机分成5个处理,每个处理4个重复,每个重复30只;在玉米-豆粕型基础日粮中分别添加0(对照)、250、500、750、1 000 mg/kg 5个水平的豆粕提取复合物。试验结果表明:日粮中添加500、750、1 000 mg/kg豆粕提取物可提高肉仔鸡粗蛋白表观代谢率(P<0.05)和α-淀粉酶活性(P<0.01)、脂肪酶活性(P<0.05)及总蛋白水解酶活性(P<0.05);500 mg/kg组可显著提高粗脂肪表观代谢率(P<0.05);当添加量达到1 000 mg/kg时,上述各项指标均表现不同程度下降的趋势,但差异不显著(P>0.05)。综合考虑各研究因素影响,建议在玉米-豆粕型肉仔鸡日粮中豆粕复合提取物的适宜添加水平为500~750 mg/kg。
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促进吉林省水稻种业发展的对策探讨
《农业科技管理 》 2015
摘要：吉林省是我国东北地区主要的粳稻生产基地之一。近年来,常规育种研究徘徊不前,超级稻品种老化、单一化现象日趋明显。同时,在育种、育繁、推广体系中又面临着诸多现实问题,严重制约着吉林省种业的发展。基于此,文章在对吉林省水稻种业现状进行分析的基础上,结合笔者多年来在水稻科研和成果推广等方面的工作经验,深入剖析吉林省种业目前存在的问题和产生原因,提出了加快种业育、繁、推一体化进程,加强政策引导,深化种业扶优扶强政策和完善成果评价体系等一系列未来发展建议。
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北方地区不同花生(Arachis hypogea L.)品种结荚期光合日变化的比较研究
《内蒙古农业大学学报(自然科学版) 》 2015 北大核心
摘要：在大田条件下,采用Li-6400光合测定系统于花生结荚期测定北方地区4种花生品种的光合日变化,并通过相关分析探讨了各环境因子对净光合速率的影响。结果表明:4种花生品种叶片净光合速率(Pn)日变化均呈双峰曲线,峰值分别出现在12:00和16:00,具有光合"午休"现象。其中LH12和HY22光合午休主要是气孔限制引起,而HY20和HY16光合午休的主要是非气孔限制引起。由此可见不同花生品种,其光合日变化"午休"限制因子不同;4种花生品种蒸腾速率(Tr)日变化呈单峰、双峰两种曲线类型。HY20和HY16蒸腾速率日变化呈双峰曲线,而LH12和HY22蒸腾速率日变化呈单峰曲线。相关分析表明,4种花生品种净光合速率、蒸腾速率与气孔导度(Cond)都呈极显著或显著正相关,与大气CO2浓度(Ca)都呈极显著或显著负相关。Tr、Cond和Ca是影响花生光合速率日变化的主要因子。
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培育适宜机械化生产的粒用高粱杂交种应重视的几个问题
《农业与技术 》 2015
摘要：培育适宜机械化的杂交种:重视植株高度和形态,以便增加密度提高产量;重视倒伏问题,茎秆强,根系发达,抗病虫能力强;株高整齐一致,自身调节能力强;要耐除草剂;种子质量高,籽粒整齐度好,芽势强。
关键词： 粒用高粱 机械化品种:选育问题
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玉米淀粉分支酶基因SBEⅡ b高效沉默表达载体的构建及转化表达
《生物技术进展 》 2015
摘要：淀粉分支酶(starch branching enzyme,SBE)是淀粉合成的限速酶。为了进一步研究SBEⅡb沉默对玉米生长及直链淀粉合成的影响,克隆了玉米(Zea mays)淀粉分支酶SBEⅡb基因片段,构建了SBEⅡb的发卡结构表达载体p TFU-SBEⅡb hairpin,用农杆菌介导法将其导入玉米HiⅡ幼胚中,经除草剂筛选获得了194株转化再生植株,其中4株结实,获得转基因种子35粒。T1代植株经PCR及试纸条检测获得3株阳性材料,半定量RT-PCR结果得出SBEⅡb的表达量降低,推断出基因表达水平降低对直链淀粉的合成具有正效应。
关键词： 玉米 淀粉分支酶SBEⅡ b ihpRNA载体 直链淀粉
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玉米AGPase-bt2与GPN1蛋白互作的双分子荧光互补技术研究
《西北农林科技大学学报(自然科学版) 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：【目的】解析玉米淀粉合成限速酶ADP-葡萄糖焦磷酸化酶(AGPase-bt2)与糖酵解关键酶甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GPN1)在植物体内是否存在相互作用。【方法】首先克隆获得AGPase-bt2和GPN1基因,然后采用双分子荧光互补技术(BiFC),构建326-CYCHA-AGPase-bt2和326-CYNEE-GPN1双分子荧光表达载体,转化农杆菌EHA105,并用2种载体共同瞬时侵染烟草叶肉细胞,48h后在激光共聚焦显微镜下观察AGPase-bt2与GPN1的相互作用。【结果】AGPase-bt2基因长1 428bp,GPN1基因长1 497bp。双酶切鉴定结果表明,326-CYCHA-AGPasebt2、326-CYNEE-GPN1载体构建正确;PCR结果证实,植物表达载体成功转化到农杆菌EHA105中;携带有共转化基因的烟草叶肉细胞在激光共聚焦显微镜下观察到明显的黄色荧光现象,且黄色荧光与叶绿体自发的红色荧光位置重合。【结论】AGPase-bt2与GPN1在植物细胞中真实地存在蛋白互作。
关键词： AGPase-bt2 GPN1 双分子荧光互补技术 蛋白质互作
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miR-141-3P和miR-346在对靶基因FSHR的识别与验证
《中国兽医学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：为探索miRNA-141-3P和miRNA-346在大鼠腺垂体中的靶基因,并对其进行识别与验证。本研究利用PCR方法,根据Fshr(Rattus)3′UTR野生型载体序列信息设计突变引物将靶序列CAGTGTT(78-85)突变为GTCACAA和GGCAGAC(127-133)突变为CCGTCTG,以野生型载体为模板PCR扩增Fshr基因的3′UTR突变序列,将其克隆到pmiR-RB-REPORTTM双荧光素酶报告载体中。由于miRNA是通过3′UTR区作用于靶基因,因此将miRNA与构建好的报告基因载体共转,通过报告基因相对荧光值的下调来印证miRNA与靶基因的相互作用。双荧光素酶报告基因表达分析显示,rno-miR-141-3p mimic对Fshr野生型载体的报告荧光没有明显下调作用;rnomiR-346mimic对Fshr野生型载体的报告荧光有明显下调作用,相应结合位点突变后,突变型载体中的报告荧光与野生型相比有所恢复;rno-miR-141-3p mimic和rno-miR-346mimic同时处理,对野生型载体的报告荧光有一定的下调作用。在体外,rno-miR-141-3p可能不能通过Fshr上相应的3UTR位点调控报告基因的表达;rno-miR-346有可能通过Fshr上相应的3′UTR位点调控报告基因的表达。本试验为FSHR的转录后调控研究提供了理论依据。
关键词： 大鼠 腺垂体 微小RNA 繁殖调控 促卵泡素受体基因
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