科研产出
不同耐旱性青稞叶片差异蛋白分析
《作物学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为从蛋白质水平揭示不同青稞品种响应干旱胁迫的差异,分析抗旱蛋白质分子机制,本研究以干旱胁迫不敏感的旱地紫青稞（HDZ）和干旱胁迫敏感的大麻青稞（DM）为研究材料,以盆栽限量供水种植方法,对干旱处理不同梯度的青稞叶片进行叶绿素、可溶性蛋白、丙二醛含量及相对电导率4项生理指标的测定,同时利用iTRAQ技术对深度干旱胁迫青稞叶片全蛋白组进行差异蛋白分析。结果表明:随着干旱处理时间的延长,两种青稞的叶绿素和可溶性蛋白含量逐渐下降,电导率及丙二醛的含量逐渐升高,在相同处理条件下,大麻青稞的叶绿素和可溶性蛋白含量降低幅度、电导率及丙二醛含量的增高幅度明显高于旱地紫青稞;对两个青稞品种的干旱胁迫和正常培养的比较组进行iTRAQ分析,共定量出4163个蛋白（多肽）,其中旱地紫青稞比较组中对比正常培养,筛选到表达上调的蛋白68个,下调的蛋白63个,在大麻青稞的比较组中筛选出表达上调蛋白21个,下调蛋白32个。KEGG通路分析表明,富集程度位于前3位的通路是代谢、氨基酸的生物合成以及次级代谢产物的生物合成,主要涉及到柠檬酸循环、碳循环等代谢通路,丙氨酸、精氨酸等氨基酸的合成降解以及花生四烯酸、亚麻酸等次级代谢产物的合成。本研究从蛋白组水平筛选了青稞干旱胁迫响应相关的代谢通路和其他相关功能的蛋白,为揭示青稞干旱胁迫的应答分子调控机制提供了一定的理论基础。
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超声波-酶法提取苤蓝花青素的工艺优化及体外抗氧化性
《分子植物育种 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为研究苤蓝花青素提取工艺及其抗氧化性,本研究采取超声波辅助和酶辅助两种方法进行了提取和工艺优化,并对提取出的花青素进行抗氧化分析.在酶辅助法中通过单因素实验研究了料液比、水浴温度、酶用量、水浴提取时间对花青素提取率的影响;在超声法中研究了料液比、超声温度、超声时间对花青素提取率的影响,最终通过单因素实验筛选出的最优结果又通过三因素三水平的正交试验优化了两种提取工艺,并采用DPPH法对花青素进行抗氧化分析.结果 表明,酶法最优提取工艺为料液比1∶25、纤维素酶用量2%、提取温度45℃、提取时间为90 min;超声法最优提取工艺为料液比1∶25,超声时间90 min,超声温度45℃;苤蓝中花青素具有极强的抗氧化性.本研究为今后苤蓝花青素的提取及开发利用提供了参考.
关键词： 苤蓝;花青素;提取工艺;抗氧化性
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高原地区不同青蒜品种农艺性状与营养品质的差异分析
《分子植物育种 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为探究高原青蒜品种的农艺性状及营养品质的差异,本研究利用差异显著性、相关性及主成分分析对5份大蒜品种的9个农艺性状和11个营养品质指标进行了比较。结果表明,不同青蒜品种的农艺与品质性状差异显著,其中农艺性状的变异范围为11.03%～60.54%,品质性状的变异范围为10.33%～56.81%。相关性分析发现,假茎粗与6个品质性状呈显著或极显著关系,假茎粗是与青蒜营养关联最多的农艺性状。主成分分析共提取了4个主成分,其中主成分1和主成分2的方差贡献率分别为46.19%和26.85%,主成分1中"叶片颜色因子"（叶绿素a,叶绿素b,类胡萝卜素和总叶绿素的含量）和主成分2中"株形因子"（株幅,假茎长,假茎长/株高）为青蒜品种评价中的主要指标。青蒜品种的农艺与品质性状综合得分为QS3>QS1>QS5>QS4>QS2。综上说明,QS3的农艺与品质性状最佳,可作为优良高原青蒜资源在青海高原地区栽培推广;同时,叶绿素相关指标的含量、株幅、假茎长、假茎长/株高是高原青蒜商品性的重要评价指标,这将为高原青蒜品种的筛选鉴定提供重要参考。
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大蒜果聚糖合成相关基因As6G-FFT的克隆及表达分析
《园艺学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：果聚糖是大蒜的主要贮藏物质,其代谢与产量形成和逆境适应性密切相关。从‘乐都紫皮大蒜’中克隆得到果聚糖︰果聚糖6G–果糖基转移酶基因As6G-FFT的序列,其CDS全长为1 839 bp,编码612个氨基酸,分子量为68.64 kD,等电点（pI）为5.43,属于亲水性蛋白;结构域分析表明,该基因推导的氨基酸序列含有植物糖基水解酶32家族的NDPSG、RDP和EC保守结构域;在进化关系上,As6G-FFT氨基酸序列与洋葱最为接近。亚细胞定位发现,As6G-FFT蛋白集中分布于内质网中。荧光定量PCR分析表明,As6G-FFT在大蒜各组织中均有表达,其表达量表现为叶片>根>母瓣>假茎;另外,在低温（4℃）或干旱胁迫（基质相对含水量45%～55%）不同阶段各组织中As6G-FFT的表达特性差异显著,干旱胁迫能够较早地诱导根中As6G-FFT的表达,而低温胁迫下母瓣As6G-FFT的响应更加敏感,说明不同胁迫下大蒜各组织As6G-FFT对逆境的响应机理有所差异。
关键词： 大蒜 果聚糖 As6G-FFT 基因克隆 表达分析
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不同颜色蚕豆种皮酚类物质组成及抑菌活性研究
《核农学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为了提高蚕豆加工副产物的综合利用率,筛选天然多酚抑菌剂的功能原料,本试验以5种不同颜色蚕豆种皮为研究对象,比较不同颜色蚕豆种皮中酚类物质的含量、组成及抑菌活性的差异,初步探讨蚕豆种皮中发挥抑菌活性的多酚物质种类。结果表明,5种不同颜色蚕豆种皮中总酚含量为165.94～8 487.62 mg·100g-1,总黄酮含量为11.26～209.01 mg·100g-1,花色苷含量为1.08～65.64 mg·100g-1。紫红蚕豆种皮总酚、花色苷含量最高,黑蚕豆总黄酮含量最高。没食子酸和原儿茶酸为蚕豆种皮中的主要酚酸物质,儿茶素、杨梅素、根皮素及槲皮素为主要的黄酮类物质,矢车菊素、矢车菊素-3-葡萄糖苷、飞燕草素和飞燕草素-3-葡萄糖苷为主要花色苷类物质,且深色蚕豆种皮具有较的高酚类物质含量。抑菌活性结果表明,深色蚕豆种皮对大肠杆菌和沙门氏菌的抑制能力较强,且总酚、总黄酮含量与沙门氏菌抑菌活性呈显著正相关（P<0.05）,而花色苷含量与大肠杆菌抑菌活性呈显著正相关（P<0.05）,没食子酸及矢车菊素是发挥抑菌作用的主要物质。综上,深色蚕豆种皮含有丰富的酚类化合物,且具有较高的抑菌活性,本研究为蚕豆种皮综合加工利用提供了一定的理论基础。
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设施辣椒连作对土壤理化性状、酶活性及微生物区系的影响
《中国土壤与肥料 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：以青海省尖扎县设施辣椒连作土壤为对象,研究不同连作年限土壤理化性状、酶活性及微生物区系的变化。结果表明,土壤理化性状、酶活性、微生物数量及微生物量均表现出明显的连作效应。随着连作年限的增加,土壤容重和电导率呈上升趋势,pH呈下降趋势,有机质、全氮、有效磷和速效钾呈先上升后下降趋势。土壤碱性磷酸酶、蔗糖酶、淀粉酶和过氧化氢酶随连作年限的增加均呈下降趋势,脲酶和碱性蛋白酶呈先上升后下降趋势。与对照相比,连作导致土壤细菌与真菌数量的比值降低,土壤微生物量碳与微生物量氮比值升高,土壤微生物群落结构由"细菌型"转变为"真菌型"。
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多孢木霉HZ-31菌株对藜的生理生化特性的影响
《甘肃农业大学学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：[目的]明确多孢木霉HZ-31菌株对藜植株体内生理生化特性的影响.[方法]利用酶活力测试法测定了HZ-31菌株接种藜植株后体内丙二醛(MDA)含量、过氧化氢酶(CAT)活性、过氧化物酶(POD)活性、多酚氧化酶(PPO)活性、苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、可溶性糖含量和叶绿素含量.[结果]多孢木霉HZ-31菌株接种藜后其体内MDA和可溶性糖含量及CAT、PPO和SOD的活性较对照明显增加,且呈上升趋势,增加量最高分别达到67.91%、69.37%、81.88%、37.68%和8.12%,7 d后除MDA呈下降趋势外,其他指标均呈增加趋势;叶绿素含量第3天后低于对照,呈下降趋势;POD活性呈平稳变化趋势且始终高于对照;而PAL活性呈先上升再下降的趋势.[结论]多孢木霉HZ-31侵染藜后,藜防御酶体系被激活,抗侵染性增强.
关键词： 多孢木霉HZ-31;侵染;藜;防御酶
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青海省BYDV株系鉴定及BYDV-GAV燕麦分离物基因组序列的测定与分析
《麦类作物学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：大麦黄矮病毒(Barley yellow dwarf virus,BYDV)所引起的麦类作物黄矮病是世界范围内的一个重要病害,对麦类作物生产影响巨大.近年来,该病害在青海省内不断发生流行,为明确该病害在青海省内的主要流行株系,采集90份来自6个地区(青海省西宁市、海西州、海南州、海东市、玉树州、黄南州)的小麦、燕麦、青稞田间病样,利用RT-PCR、基因克隆、序列拼接等技术进行相关试验及分析.结果 表明,BYDV-GAV为青海省BYDV的主要流行株系.对青海省BYDV-GAV燕麦分离物进行全基因组克隆与序列分析,发现本试验所获得的BYDV-GAV燕麦分离物与BYDV-GAV中国分离物聚类到一个组内,序列同源性达96.85%~98.08%,说明该燕麦分离物为中国BYDV-GAV的一个分离物.本研究明确了青海省BYDV的流行株系,并获得了燕麦BYDV-GAV全基因组序列,可为后期该病害的防治提供一定的理论支持.
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CRISPR/Cas9介导的拟南芥TT1基因的敲除
《分子植物育种 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：在菜油品质上黄籽相较于褐籽更为优良,且更易于合成高质量的生物柴油.已有研究表明TT1(TRANSPARENT TESTA1)基因是类黄酮代谢途径中的关键基因,为了通过CRISPR/Cas9基因编辑载体验证TT1基因在白菜型油菜中的功能,本研究先在拟南芥中进行了TT1基因的编辑.构建了CRISPR/Cas9 TT1基因编辑载体,通过农杆菌介导侵染拟南芥花序的遗传转化方式将编辑载体引入拟南芥Columbia生态型,通过表型观察发现T1代12株阳性苗中产生了11株表型株,其中1株表现为褐籽,2株表现为黄籽,9株表现为黄籽和褐籽的嵌合.测序检测分析其突变型结果发现,TT1靶位点处有单碱基缺失、单碱基插入、多个碱基缺失、碱基缺失后插入以及两个靶位点之间多个碱基缺失的多种突变类型.T2代获得一株纯合突变体,TT1两个靶位点之间产生79 bp的碱基缺失,且全株表现为黄籽.本研究为CRISPR/Cas9载体在白菜型油菜中TT1基因功能验证提供借鉴,并为其它作物TT1同源基因的功能验证提供了新的突变体材料.
关键词： 拟南芥 CRISPR/Cas9 TT1 粒色 突变分析
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