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qRT-PCR分析莱茵衣藻氮、硫同化相关基因的表达

热带作物学报 2014 北大核心 CSCD

摘要:实验发现,缺氮、缺硫的环境有利于莱茵衣藻油脂的积累,说明与氮、硫同化相关的基因也与油脂合成有着密切的关系。分析了氮、硫同化通路相关基因,选择氮同化相关的6个基因(NAR3、NAR1.1、NII1、NIA1、NIT2、AOX1)以及硫同化相关的6个基因(SULP1、SIR1、SLT1、ARS1、SULTR1、ATS1)进行q RT-PCR分析。对莱茵衣藻CC124以及CC425藻株分别进行缺氮、缺硫处理,Trizol法连续提取4 d的RNA作为模板,进行实时荧光定量PCR检测基因的表达水平。结果发现,这12种基因均较对照上调表达,其中,莱茵衣藻氮、硫运载体基因上调表达非常显著。缺氮条件下NAR3、NAR1.1较正常最高上调表达200倍;缺硫条件下SLT1较对照有1 000~2 000倍的m RNA表达量,SULTR2也最高能增高450倍的表达量。

关键词: 莱茵衣藻 缺氮 缺硫 qRT-PCR

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香蕉枯萎病菌全局性调控因子FocVeA基因的克隆及功能预测

生物技术通报 2014 北大核心 CSCD

摘要:根据轮枝样镰刀菌(Fusa rium ve rticillioides)和藤仓镰刀菌(F.fujikuroi)veA同源基因相关序列设计引物,利用PCR与RT-PCR技术分别克隆了香蕉枯萎病菌2个生理小种的FocV eA基因序列和开放阅读框,同时对该基因的编码蛋白进行序列特征、系统发育与结构域分析。结果表明,2个生理小种的FocVeA基因(分别命名为F1VeA和F4VeA)的DNA片段全长分别为1 693 bp和1 690 bp,开放阅读框分别为1 599 bp和1 596 bp,分别编码532个和531个氨基酸。F1VeA和F4VeA基因预测氨基酸序列相似性均为9 9%,与G enBank中公布的Fusarium spp.veA基因氨基酸序列均有78%-99%相似性。系统聚类分析显示,F1V eA和F4VeA与GenBank中已登录的轮枝样镰刀菌(F.verticillioides)和藤仓镰刀菌(F.fujikuroi)等veA同源蛋白高度同源。蛋白质保守域搜索表明,FocVeA具有veA蛋白的功能域,属于veA蛋白家族的一员,推测该基因可能参与调控F.oxysporum f.sp.cubense的生长、毒素合成及致病性等。

关键词: 香蕉枯萎病菌 FocVeA基因 克隆 序列分析

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橡胶树胞质型谷胱甘肽还原酶基因的克隆与表达分析

植物生理学报 2014 北大核心 CSCD

摘要:根据橡胶树GR1基因(Hb GR1)部分序列设计特异引物,运用RACE和RT-PCR技术克隆Hb GR1全长c DNA序列;运用DNAMAN、MEGA 6.06、Prot Param及Signal P 4.1 Server等生物信息学软件对Hb GR1序列、GR1系统进化关系及Hb GR1的基本理化性质和亚细胞定位等进行分析;利用实时荧光定量PCR技术研究Hb GR1的表达模式;构建原核表达载体p EASYE1-Hb GR1,并将其转入大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导融合蛋白原核表达。获得2 082 bp的Hb GR1全长c DNA,其中5′非编码区293 bp,3′非编码区298 bp,开放阅读框长1 491 bp,共编码496个氨基酸,其编码的蛋白分子质量约为53.68 k Da,理论等电点p I为6.18。序列分析发现Hb GR1无信号肽,在氨基酸水平上与其他植物GR1具有很高的同源性,包含植物GR典型的NADH结合结构域、二聚体结构域和高度保守的GGTCV[I/L]RGCVPKK[I/L]LVY基序。对植物GR进行系统进化分析表明,Hb GR1属于双子叶植物GR分枝,与同属大戟科的蓖麻亲缘关系最近。实时荧光定量PCR结果表明Hb GR1在橡胶树胶乳、叶片、树皮和花中均表达;Hb GR1表达受死皮、乙烯、茉莉酸、过氧化氢和伤害调控。SDS-PAGE电泳结果表明重组质粒p EASY-E1-Hb GR1在大肠杆菌BL21(DE3)中有效表达一个分子量约为55 k Da的融合蛋白。

关键词: 橡胶树 GR1 氧化胁迫 序列分析 表达模式 原核表达

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6种真菌诱导子对V3蝴蝶兰组培苗生长的影响

广东农业科学 2014 北大核心 CSCD

摘要:为优化蝴蝶兰种苗快繁技术体系,探索一种无激素培养的蝴蝶兰组培方法,将从野生兰中分离得到的6种菌根真菌制成真菌诱导子分别按40、60、80 mL/L的剂量加入到基础培养基中,研究其对V3蝴蝶兰组培苗生长的影响。结果表明:培养90 d后,处理1、2等13个处理均能极显著地促进鲜重的增长,其中处理6、13、16和处理18效果最佳;处理9、10、13的叶绿素a、叶绿素b、叶绿素(a+b)的含量均极显著高于CK。结合对鲜重和叶绿素的影响,添加40 mL/L的Y5、80 mL/L的Y3最适合用于对蝴蝶兰组培苗的促生生产中。

关键词: 真菌诱导子 蝴蝶兰 组织培养

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黄皮果皮中的抗菌活性成分研究

热带亚热带植物学报 2014 北大核心 CSCD

摘要:为了解黄皮[Clausena lansium(Lour.)Skeels]果皮中的抗菌活性成分,采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱等方法,从黄皮果皮的乙醇提取物中分离得到10个化合物,经波谱学分析鉴定为:lansine(1)、3-甲酰基咔唑(2)、3-甲酰基-6-甲氧基咔唑(3)、6-甲氧基咔唑-3-羧酸甲酯(4)、(6R,7E,9S)-9-羟基-4,7-巨豆二烯-3-酮(5)、7-羟基香豆素(6)、8-羟基呋喃香豆素(7)、辛黄皮酰胺(8)、对羟基肉桂酸甲酯(9)和胡萝卜苷(10)。其中化合物5和9为首次从黄皮属植物中分离得到,化合物8的碳谱数据是首次报道。用滤纸片琼脂扩散法测定化合物的抗菌活性,结果表明,化合物1、2、3、6、7和9对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)有抑制作用。这有利于更好地开发利用黄皮这一药食两用的水果资源。

关键词: 芸香科 黄皮 化学成分 抗菌活性

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发酵法制备竹笋下脚料膳食纤维的研究

热带作物学报 2014 北大核心 CSCD

摘要:通过利用根霉菌发酵过程中消耗糖类和蛋白质的作用,从竹笋下脚料中制备纯度高、品质佳的膳食纤维。正交试验结果表明,原料粉20目,液料比1∶15(g/mL),34℃下发酵32 h可获得品质较好的竹笋膳食纤维,得率达到54.53%,总膳食纤维含量54.2%。与传统化学法相比,微生物发酵法具有原料损失少、得率和可溶性膳食纤维含量高的优点,制备的膳食纤维持油力相近,持水力和溶胀度显著提高。品质测定结果表明,发酵法制备的膳食纤维食用性和功能活性较高,并且保持了竹笋本身特有的风味。根霉发酵条件温和,工艺简单,易于放大,是一种高效制备毛竹笋下脚料膳食纤维的方法。

关键词: 毛竹笋 根霉 发酵 膳食纤维 产品特性

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海南岛胡椒地穿刺巴斯德芽菌鉴定与多样性分析

广东农业科学 2014 北大核心 CSCD

摘要:穿刺巴斯德芽菌(Pasteuria penetrans)是根结线虫(Meloidogyne spp.)的专性寄生菌,且是研究最多的线虫天敌细菌之一。胡椒作为海南的主要经济作物之一,根结线虫发病率较高。前期的研究发现,在海南岛胡椒中较易分离到P.penetrans。结合形态学和16S rRNA序列分析的方法,着重对海南岛6个市县共13个胡椒园进行P.penetrans资源鉴定发现,在经筛选获得的33个具代表性巴斯德芽菌克隆中,32个克隆子被鉴定为P.penetrans,而克隆子tf-1与P.penetransT(AF077672)的相似性仅为97.7%,且在发育树上处于独立分支,可能为巴斯德芽菌属的一个新种。聚类分析结果发现,海南岛存在较丰富的P.penetrans资源,但在不同的地理区域内没有发现明显的种内地域特异性。

关键词: 海南岛 穿刺巴斯德芽菌 16S rRNA 系统发育分析

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不同施肥处理对木薯园土壤养分、酶活性及木薯生长的影响

中国农学通报 2014 CSCD

摘要:为了探讨施肥水平和肥料配比方式对木薯土壤养分、酶活性以及木薯生长的影响,采用大田试验,以木薯新品种‘华南7号’为试验品种,设置不同的施肥水平和肥料配比方式,比较分析木薯园土壤养分、酶活性大小及木薯生长性状。结果表明:施肥会促进土壤酸化,降低土壤p H,施肥量越多,土壤酸化越严重。有机肥和复合肥混施加重土壤酸化程度,增加土壤有机质含量最高;D处理(667 m2施有机肥350 kg)土壤碱解氮、有效磷和速效钾含量最高,其中有效磷和速效钾都显著高于A处理(不施肥CK);施肥会整体增加土壤脲酶、酸性磷酸酶和过氧化氢酶活性,其中D处理在提高土壤酶活性上起到最显著的作用;E肥(667 m2施有机肥150 kg+复合肥33 kg)对植物生长的促进作用比单施有机肥明显。因此,选择将有机肥与复合肥合理配施,既能保持地力,又能促进木薯生长以进一步达到高产。

关键词: 施肥处理 木薯 土壤养分 土壤酶活性 生长

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木薯种质的遗传多样性评价及高产种质初级筛选

植物遗传资源学报 2014 北大核心 CSCD

摘要:为加强木薯现有选育材料和引进种质的研究利用,本研究以主栽品种SC8和SC205为对照,对142份选育材料和8份瑞士引进新种质进行了16个表型性状的鉴定和EST-SSR标记,分析和评价其遗传多样性;运用主成分分析法挖掘高产木薯种质。分子标记聚类分析表明种质间的遗传相似系数均值为0.652,基于表型性状的聚类遗传相似系数均值为0.186,2种聚类结果之间差异显著,但均表明种质间有一定的遗传差异。2年产量相关性状调查结果差异极显著,表明受环境影响较大。产量相关性状的主成分分析结果表明,C322综合评价表现最好,G74综合评价表现最差,同时,有47份选育材料的综合评价优于2份对照。在今后杂交育种工作中可选择亲缘关系较远且表型差异互补的种质作为杂交亲本,以进一步聚合优良性状,改良不利性状。

关键词: 木薯 EST-SSR 表型性状 遗传多样性 种质筛选

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反季节龙眼成花差异的碳素分析

广东农业科学 2014 北大核心 CSCD

摘要:具有相近树体状况的龙眼树在催花之后,有的可以成花,有的却只能抽生叶芽。为了研究出现这种差异的原因,以成花和未成花两种反季节催花龙眼树为对比试材,研究了氯酸钾催花之后树体成熟叶、嫩叶、成熟枝、嫩枝、顶芽中碳素含量差别。结果表明:碳素在成花过程中有重要作用。成熟叶片碳素含量达到50.93 mg/g的树可以成花,成熟叶片碳素含量在37.40 mg/g以下的反季节龙眼难以成花。同时嫩叶成熟度对成花的影响很大,较为成熟的嫩叶含有较高的碳素含量,该类树也容易成花。这可以作为反季节龙眼树体催花的一个新的判定标准。

关键词: 龙眼 催花 成花差异 碳素

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