科研产出
cDNA-SRAP标记在玉米氮素营养诊断上的应用初探
《华北农学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：为探讨对玉米氮素营养状况进行分子诊断的可行性,以大面积推广的玉米(Zea mays)杂交种郑单958为材料,用cDNA-SRAP标记的方法研究了玉米幼苗在不同氮素水平下基因表达的差异,对其中的一些差异表达片段进行了克隆和测序,并通过Real-time PCR鉴定了克隆的差异表达片段的真实性。结果表明:不同的SRAP标记引物对扩增效率不同,玉米基因表达受到氮素水平的严格调控,cDNA-SRAP标记的方法与Real-time PCR检测到的基因表达情况基本一致,基因差异表达片段N1、N9、N20、N30可作为玉米缺氮的分子诊断的候选靶标。因此cDNA-SRAP标记可以用来研究植物营养状况的分子诊断。
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喷洒磷酸二氢钾和杀菌剂对强筋小麦郑麦366千粒重和品质的影响
《河南农业科学 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：以小麦品种郑麦366为试验材料,研究了小麦生长后期叶面喷洒磷酸二氢钾和杀菌剂对强筋小麦千粒重及品质的影响,以期为高产优质高效栽培措施的制定提供依据。结果表明,喷磷酸二氢钾和杀菌剂对小麦千粒重和品质有不同程度的影响。喷施3次粉锈宁、多菌灵、禾果利、磷酸二氢钾的处理,其千粒重分别比喷洒1次的处理高6.1%、4.4%、2.5%和0.8%;分别比喷洒清水对照高8.2%、12.1%、9.4%和7.9%,差异达到显著或极显著水平。叶面喷磷酸二氢钾和杀菌剂影响小麦湿面筋和干面筋含量,喷施3次粉锈宁、多菌灵、磷酸二氢钾的处理小麦湿面筋含量分别比喷洒清水对照高1.9、1.7和1.3个百分点,只有喷洒3次禾果利的处理比对照减少0.3个百分点;喷施3次粉锈宁、多菌灵、禾果利、磷酸二氢钾的处理小麦干面筋含量分别比喷洒清水对照高0.3、1.6、1.6和0.7个百分点。但过度喷施杀菌剂对郑麦366的加工品质有一定程度的副作用,其中喷施3次粉锈宁、多菌灵、禾果利、磷酸二氢钾的处理面团稳定时间分别比喷洒清水对照减少4min、5min、1min和3min;喷施3次粉锈宁、多菌灵、磷酸二氢钾的处理面团稳定时间比喷施1次(扬花期)的处理分别减少3min、3min和2min,只有喷洒3次禾果利的处理与喷洒1次的处理相同。
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对虾白斑综合征病毒LAMP检测方法的建立
《中国兽医科学 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：根据对虾白斑综合征病毒(WSSV)囊膜蛋白VP28的基因序列设计合成4条特异性引物,以pMDT-VP28重组质粒为标准模板,通过优化反应体系和反应条件,建立了WSSV的环介导等温扩增(LAMP)检测方法,测定LAMP对WSSV-DNA的最低检测限,并与巢式PCR进行了比较。结果显示,该LAMP方法的最佳反应温度为65℃,反应时间为60min;LAMP对WSSV的最低检测限为10copies/μL,而巢式PCR为100copies/μL,表明该LAMP方法的敏感性显著高于巢式PCR检测方法。因此,WSSV的LAMP检测方法比PCR更为简便、快速、灵敏,且无需昂贵的变温仪器,更适应水产养殖的现地检测,本研究为WSSV早期感染的快速检测提供了新方法。
关键词： 对虾白斑综合征病毒 环介导等温扩增 巢式聚合酶链反应 VP28基因
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芝麻子叶基因转化受体系统的建立
《分子植物育种 》 2011 CSCD
摘要：试验以芝麻栽培种豫芝11号为材料,对子叶丛生芽诱导及植株再生体系以及子叶受体材料对卡那霉素、潮霉素和头孢霉素的天然耐性进行了研究,建立了芝麻子叶基因高频转化受体系统。结果表明,适宜的诱芽培养基为MS+5.0mg/L6-BA+1.0mg/LIAA+5.0mg/LAgNO3+1.0mg/LABA+3%蔗糖+0.8%琼脂;6-BA对子叶膨大起决定作用,ABA、IAA则是诱导丛生芽高频发生的关键因子,AgNO3对丛生芽发生有显著的促进作用。在芝麻子叶膨大出芽期、芽增殖期及试管苗生根期等遗传转化的三个重要时期,适宜的卡那霉素筛选浓度分别为70mg/L、70mg/L、20mg/L,潮霉素筛选浓度分别为40mg/L、60mg/L、10mg/L。在农杆菌介导的芝麻遗传转化中,头孢霉素使用浓度以500mg/L为宜,抑菌效果好且不影响转化受体生长。
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新霉素免疫膜层析检测方法研究
《中国农业科学 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：【目的】研制新霉素(neomycin,NEO)免疫膜层析快速检测试纸。【方法】建立分泌抗新霉素单克隆抗体(NEO mAb)杂交瘤细胞株,用胶体金免疫膜层析试验(GICA)制备NEO残留快速检测试纸(NEO-Strip),并对其性能进行鉴定。【结果】抗新霉素单克隆抗体的亲和力常数为3.75×1010 mol.L-1;制备的NEO-Strip目测限为50 ng.mL-1;试纸可特异性检测NEO,与庆大霉素、链霉素、妥布霉素、紫苏霉素、莱克多巴胺、沙丁胺醇、泰乐菌素和氯霉素等其它药物均无交叉反应性;就定性检测而言,其结果与高效液相色谱串联质谱法(HPLC-MS-MS)完全一致;不同的基质液对试纸的敏感度影响甚微。【结论】建立了特异的NEO免疫层析检测方法。
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moFcγRⅢ、γ链真核表达载体的构建及其共转染稳定细胞系的建立
《河南农业科学 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：将moFcγRⅢ、γ链编码区cDNA分别亚克隆到真核表达载体pcDNA3的巨细胞病毒启动子下游,构建了重组表达质粒pc3moRⅢ、pc3moγ;用PvuⅠ线性化重组质粒,以线性化重组质粒共转染COS-7细胞,用玫瑰花环试验检测moFcγRⅢ在转染细胞表面的表达,通过G418抗性筛选和单细胞克隆,在转染细胞表面稳定表达了moFcγRⅢ受体分子。稳定转染细胞系的建立和moFcγRⅢ受体分子基因的表达,为进一步研究moFcγRⅢ的功能提供了基础。
关键词： moFcγRⅢ COS-7细胞 玫瑰花环试验 真核表达 共转染
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SPE-柱前衍生-HPLC法研究阿维菌素在甘蓝及土壤中的残留动态
《安徽农业科学 》 2011 北大核心
摘要：[目的]建立SPE-柱前衍生-HPLC法测定甘蓝和土壤中阿维菌素残留量的分析方法,并研究阿维菌素在甘蓝和土壤中的残留动态和最终残留量。[方法]样品用乙腈提取,C18固相萃取(SPE)小柱净化,经N-甲基咪唑(NMIM)和三氟乙酸酐(TFAA)衍生化,用乙腈定容,最后用液相色谱-荧光检测器(激发波长为365 nm,发射波长为475 nm)进行测定。[结果]阿维菌素在甘蓝中半衰期为1.5~5.4 d,在土壤中降解的半衰期为6.7~8.8 d。建议45.5%阿维菌素.丁醚脲悬浮剂防治十字花科蔬菜中的小菜蛾,在推荐剂量下最多施药2次,安全间隔期为4 d。[结论]建立的分析方法操作简单,方法的精密度、准确度和灵敏度都符合农药残留标准要求,适用于基质复杂的甘蓝和土壤中阿维菌素的残留测定。
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添加尿素对金针菇菌丝生长和产量的影响
《中国食用菌 》 2011 北大核心
摘要：研究了在培养料中添加不同含量的尿素对袋栽金针菇菌丝生长速度、产量和生物转化率的影响。结果表明,添加尿素的含量为0.2%时,菌丝生长最快,达到0.31 cm.d-1;产量和生物转化率最高,分别为210 g.袋-1和70.0%。
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