科研产出
根结线虫拮抗放线菌的筛选及菌株HAL0002的鉴定与活性物质分析
《植物保护 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：为了筛选获得对根结线虫具有拮抗能力的强活性放线菌菌株,并从菌株中发现新的杀线虫活性化合物,从海南东寨港红树林采集海泥样品9份,从五指山原始森林等地采集土壤样品51份,用平板稀释法对海泥和土壤样品进行分离;以南方根结线虫2龄幼虫为靶标线虫,采用24孔细胞培养板液体线虫法进行初筛和复筛;根据形态特征、培养特征、生理生化特征和16S rDNA序列对复筛出的活性菌株进行鉴定;菌株发酵液经溶媒萃取、硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶过滤和制备薄层板层析,采用活性跟踪法从中分离纯化杀线虫活性化合物;化合物经光谱及波谱分析和文献对照,进行结构鉴定.从60份样品中分离得到356株菌落形态有差异的放线菌.初筛得到16株对根结线虫校正死亡率在80%以上的菌株,复筛获得3株线虫校正死亡率在95%以上的菌株,其中分离自海泥样品中的菌株HA10002抗线虫活性最强,发酵原液的校正死亡率达100%.HA10002经鉴定为白浅灰链霉菌,从其发酵液中分离获得2个活性化合物,其中A26-3为Nocardamine,A22-1的结构正在进一步鉴定中.上述结果表明,筛选出的放线菌HA10002能合成2种以上杀根结线虫的活性代谢产物,是一株遗传稳定且具有开发潜力的活性菌株.
关键词： 根结线虫 拮抗放线菌 筛选 菌株鉴定 活性物质分析
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接种丛枝菌根真菌(AMF)及施磷量对狗牙根抗旱性的影响
《热带作物学报 》 2011 CSCD
摘要：通过盆栽试验,探讨了不浇水处理下施磷量和丛枝菌根真菌(arbuscular mycorrhizal fungi,AMF)对狗牙根[Cynodon dactylon(L.)Pers.]抗旱性能的影响。结果发现:(1)与正常浇水处理相比,不浇水处理显著降低了狗牙根的叶片相对含水量(LRWC)和叶绿素(Chl)含量,同时显著增加了细胞膜透性(RPP)、游离脯氨酸(PRO)、丙二醛(MDA)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)活性,但对菌根侵染率和可溶性糖含量的影响较小;(2)与不接种处理相比,接种AMF处理的狗牙根的菌根侵染率和可溶性糖含量增加显著,其它指标则无显著变化,尤其是在不浇水情况下,单一接种聚丛球囊霉(Glomus aggregatum)或摩西球囊霉(G.mosseae)对狗牙根的抗旱性的改善效果最好;(3)不同施磷水平之间狗牙根的菌根侵染率和所测的生理指标均无显著差异。
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橡胶草基因组DNA提取及RAPD反应体系的优化
《中国农学通报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：为探索适合橡胶草基因组DNA的提取方法和RAPD反应体系。采用改良CTAB法提取橡胶草叶片总DNA,得到的DNA能满足RAPD分析需要。通过单因子实验法分析DNA浓度、引物浓度、dNTPs浓度、Taq聚合酶以及Mg2+浓度对RAPD扩增结果的影响,建立了适合于橡胶草RAPD分子标记的最佳反应体系,即20μL体系中包括:模板DNA30ng、TaqDNA聚合酶1.75U、dNTPs浓度0.25mmol/L、Mg2+浓度2.0mmol/L、引物浓度0.5μmol/L、10×PCRBuffer2.0μL。RAPD扩增反应程序为:94℃预变性5min,94℃30s,37℃30s,72℃70s,45个循环,最后72℃延伸7min。该反应体系具有较好的稳定性及可重复性。
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五指山猪肺炎克雷伯菌肺炎亚种的分离及鉴定
《西北农业学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：从发病猪场濒死的五指山小猪肝脏、脾脏、小肠中分离到3株革兰氏阴性杆菌,对分离菌株进行形态学、培养特性、生化特性和分子生物学鉴定,确定分离菌株为肺炎克雷伯菌肺炎亚种。利用细菌16S rRNA通用引物对3株细菌基因组DNA进行扩增,均可得到大小为1 503 bp的特异性片段,该序列与GenBank上已经登录的猪源肺炎克雷伯菌序列同源性达99%。动物毒性试验证明其对小鼠有较强的致病性。
关键词： 肺炎克雷伯菌肺炎亚种 分离 鉴定 16SrRNA
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甘蔗渣纤维素降解菌的筛选及鉴定
《微生物学杂志 》 2011 CSCD
摘要：通过利用多种选择性培养基,从自然发酵不同阶段的甘蔗渣中分离到多种纤维素分解菌,经过初筛和复筛,获得了降解纤维素的功能菌株c1g3-3及其最适功能培养基蛋白胨纤维素培养基(PCS),并通过形态、生理生化和分子综合鉴定得出c1g3-3鉴定为木糖氧化无色杆菌(Achrom obacter xylosoxidans)。
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应用多重RT-PCR检测甘蔗黄叶病毒和高粱花叶病毒
《广东农业科学 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：建立了多重RT-PCR同时检测甘蔗黄叶病毒(Sugarcane yellow leaf virus,ScYLV)和高粱花叶病毒病毒(Sorghummosaic virus,SrMV)的技术体系,该体系可有效地对甘蔗田间植株和试管苗进行检测。根据引物之间的互补性及引物的Tm值筛选多重PCR引物。确定适宜的PCR缓冲液的浓度为1×,退火温度为53℃,延伸温度为72℃。
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15种热带乔灌木单宁含量动态分析
《草地学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：通过对15种热带乔灌木不同月份(2009年3月至2010年2月)单宁含量的测定,以期明确部分木本饲用植物单宁含量及其动态变化趋势。结果表明:15种热带乔灌木单宁平均含量由低到高顺序如下:对叶榕(Ficushispida L.f.)(0.39%)<刺桐(Erythrina variegataLinn.)(0.77%)<克拉豆(Cratylia argentea(Desv.)Kuntze)(0.78%)<假木豆(Dendrolobium triangulare(Retz.)Schindl.)(1.16%)<木豆(Cajanus cajan(Linn.)Huth)(1.29%)<双荚决明(Senna bicapsularis(Linn.)Roxb.)(1.38%)<破布叶(Microcos paniculataLinn.)(1.56%)<圆叶舞草(Codariocalyx gyroides(Roxb.ex Link)Hassk.)(1.57%)<大果榕(Ficus auriculataLour.)(1.62%)<长穗决明(Senna didymobotrya(Fresen.)H.S.Irwin et Barneby)(1.82%)<大叶千斤拔(Flemingiamacrophylla(Willd.)Prain)(1.91%)<黄牛木(Cratoxylum cochinchinense(Lour.)Blume)(2.14%)<银合欢(Leucaena leucocephala(Lam.)de Wit)(2.34%)<金合欢(Acacia farnesiana(Linn.)Willd.)(2.67%)<白饭树(Flueggea virosa(Roxb.ex Willd.)Voigt)(2.80%);15种热带乔灌木单宁含量差异较大且含量随月份变化明显。不同植物种类、生长时期、生长环境等可能是导致单宁含量差异的原因。
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香蕉枯萎病菌ste12基因的克隆与序列分析
《热带作物学报 》 2011 CSCD
摘要：为了解ste12基因在尖孢镰刀菌古巴专化型侵染香蕉过程中的作用,及其与尖孢镰刀菌古巴专化型1号和4号生理小种之间的致病力差异关系,采用PCR和RT-PCR方法扩增了2个生理小种的ste12基因,并对扩增产物进行了测序及相似序列搜索和比对,还对基因编码的蛋白进行了氨基酸序列比对和分析。研究结果表明,2个生理小种ste12基因开放阅读框均为2070 bp,存在7个碱基的差异,基因同源性为99.7%。编码689个氨基酸,氨基酸序列一个有差异。根据生物信息学软件预测编码蛋白没有信号肽,具有两个相同的功能位点,分子量和PI分别为75 ku和6.47。
关键词： 尖镰刀菌古巴专化型 生理小种 ste12基因 致病性 转录因子
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海口6株MRSA携带的新型耐药岛基因位点测序分析
《临床检验杂志 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：目的进一步确证海口发现的由耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)携带的耐药基因岛——SCCmec的型别和分析其基因位点序列差异。方法在多位点PCR分型及在互联网上与已有型别比较的基础上,将扩增产物纯化测序,用BLAST分析软件与国际基因库内的已知位点序列比较。结果 B、F、M位点序列与已有序列的同源性均在95%以上,差异为1～9bp。结论新的SCCmec型与已有的型别相比,不但有不同的位点图谱,而且位点序列有多个点突变。
关键词： DNA测序 葡萄球菌染色体mec盒 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌
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杧果树生黄单胞叶斑病病原的鉴定
《果树学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：对海南和广西杧果(台农)上发生的一种细菌性病害进行病原鉴定。采用形态观察、革兰氏染色、致病性测定、生理生化性状等常规细菌鉴定技术,结合细菌DNA促旋酶B亚单位基因(gyrB)序列特点对获得的10株细菌菌株进行分析。结果表明,供试的10株细菌菌株均为树生黄单胞杆菌(Xanthomonas arboricola)。该研究是国内外首次报道树生黄单胞杆菌(Xanthomonas arboricola)侵染杧果叶片,产生表面下陷的角斑,引起杧果叶斑病。为了区分杧果细菌性黑斑病,暂称之为杧果树生黄单胞叶斑病。
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