猪主要DNA病毒多重二温式PCR检测方法的建立及初步应用

申世川; 王一成; 姜平; 袁秀芳; 徐丽华; 李军星; 《畜牧与兽医 》 2012 北大核心

摘要：通过对GenBank发布的猪细小病毒(PPV)、伪狂犬病毒(PRV)和猪圆环病毒2型(PCV2)的核苷酸序列进行比对分析,找出PPV的VP2基因,PRV的gH基因和PCV2的ORF2基因的相对保守区域。利用生物学软件在保守序列分别设计高溶解温度引物,将常规三温式PCR过程中的退火与延伸合并为一步,通过对PCR反应条件的优化,确定最佳引物浓度、最佳聚合酶浓度、最佳退火温度以及最佳反应体积,建立了多重二温式PCR方法检测PPV、PRV和PCV2,其扩增的目的片断大小分别为PPV(142 bp)、PRV(300 bp)和PCV2(469 bp),从而节省临床检测时间,同时又能通过一个反应体系对PPV、PRV和PCV2 3种猪主要DNA病毒进行检测。用30份临床病料对本研究多重PCR技术和单项PCR技术进行对比验证,结果显示,两者的总符合率为95%以上。表明建立的多重PCR检测方法,具有高度特异、快速、敏感等特点,可用于对这3种病毒的同时检测和鉴别诊断。

关键词： PPV PRV PCV2 多重二温式PCR

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杂草和水稻梨孢菌亲缘关系研究

毛雪琴; 邱海萍; 张震; 姜华; 柴荣耀; 王教瑜; 王艳丽; 孙国昌; 杜新法; 《杂草科学 》 2012

摘要：利用12个引物的随机扩增多态性DNA标记(RAPD)对来自18种寄主的49个梨孢菌株进行了亲缘关系分析,从DNA电泳谱带中可以直观地看出,来自同一种或同一属或亲缘关系相近寄主上的梨孢菌带型较相似,相反,亲缘关系较远的寄主上的梨孢菌带型差异较大,茭白、碎米莎草和马唐寄主上的梨孢菌的谱带均非常特异,与牛筋草和狗尾草等其他15种寄主的梨孢菌有较大差异,牛筋草和狗尾草等15种寄主的梨孢菌存在比较多的共有谱带。对引物S380扩增的RAPD谱带进行聚类分析表明,18种寄主上的49个梨孢菌株可分为5个类群。种与种之间的DNA(RAPD谱带)电泳谱带差异非常明显,而种内品种间的带型差异比较小。

关键词： 梨孢菌 随机扩增多态性DNA(RAPD) 聚类分析

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金衢地区稻-麦(油)不同种植方式效益比较

陈珊宇; 闫川; 纪国成; 秦叶波; 黄益峰; 徐彬彬; 洪晓富; 郑学强; 《安徽农业科学 》 2012 北大核心

摘要：[目的]筛选适宜金衢地区的稻(Oryza sativa L.)-麦(Triticum aestivum L.)[油(Brassica napus L.)]种植方式和主栽品种。[方法]选取在金衢地区种植的油菜品种(浙双6号、浙双3号、浙双72、浙油50、浙油18)、水稻品种(中浙优1号、甬优9号)、小麦品种(扬麦14),分别进行了免耕直播、翻耕直播等种植方式比较研究,筛选直播油菜品种,对比考察油菜、水稻、小麦不同种植方式下的产量、产值、农资投入、人力投入等。[结果]油菜不同品种间产量差异显著,其中浙油50和浙双72产量最高,同一品种翻耕直播产量较免耕直播高,适宜金衢地区的油菜的种植方式是免耕直播,可选择产量高、株高适中的浙油50;水稻品种中浙优1号与甬优9号直播时的产量与移栽差异不显著,但应用直播技术较移栽可分别节本增收1 911和1 716元/hm2,综合效益较好;小麦品种扬麦14采用不同栽培方式其生育期、产量没有明显差异,但免耕直播节本增效1 110元/hm2,适宜采用免耕直播。[结论]该研究可以为金衢地区油菜(小麦)免耕直播-单季稻的直播栽培及大面积示范推广应用提供科学依据。

关键词： 水稻 小麦 油菜 免耕直播 翻耕直播 效益比较

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瓶装饮料中DNOP、DBP类增塑剂的液相色谱检测方法

王楠; 王伟; 张玉; 葛杭丽; 黎天天; 《中国食品学报 》 2012 北大核心 CSCD

摘要：邻苯二甲酸酯类是一类重要的增塑剂,也是环境类激\素,会影响动物内分泌系统;对人不仅有慢性毒性,致突变、致癌作用,还有生殖、发育毒性。本文研究高效液相色谱检测瓶装饮料中两种邻苯二甲酸酯(DNOP、DBP)的方法。样品经过滤、浓缩后过柱净化、富集,用50℃氮吹仪吹干,甲醇定容后过膜(0.22μm),在UV 225nm处检测。以ProELUT PLS GlASS 200mg/6mL小柱作为样品前处理净化柱,结果对DBP的加标回收率在83.4%～93.4%之间,对DBP的加标回收率在80.4%～86.0%之间。本实验条件下DBP和DNOP的仪器检出限均为0.01μg/mL,说明用液相色谱法检测瓶装饮料中邻苯二甲酸酯类物质含量是可行的,且快速、有效。

关键词： 增塑剂 邻苯二甲酸酯类 瓶装饮料 HPLC

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兔多杀性巴氏杆菌外膜蛋白A(OmpA)重组蛋白单克隆抗体的制备及潜在应用

刘燕; 庞安娜; 韦强; 肖琛闻; 鲍国连; 季权安; 钱微; 《农业生物技术学报 》 2012 北大核心 CSCD

摘要：制备兔多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)外膜蛋白A(OmpA)重组蛋白单抗,为兔多杀性巴氏杆菌病的诊断提供特异性强,灵敏度高的单克隆抗体。本研究选取并扩增Pm外膜蛋白基因OmpA,原核表达获得了的大小为37.6kD的OmpA重组蛋白,以纯化复性的兔多杀性巴氏杆菌OmpA重组蛋白作为免疫原,按常规方法免疫BALB/c小鼠(Mus musculus),取其脾细胞与SP2/0细胞融合,ELISA筛选出了4株分泌Pm OmpA蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为5D2、BC11、2A2和6A4。其中2A2细胞培养液效价为1∶256,5D2、BC11和6A4效价为1∶128;2A2腹水效价为1∶12800,其余3株达1∶6400。杂交瘤细胞经反复冻存、复苏及多次传代,仍能稳定分泌高效价抗体。Western blot显示,4株单克隆抗体均能与Pm OmpA重组蛋白重组发生特异性反应。用ELISA方法鉴定2A2单克隆抗体亚型为IgG2b,Protein A亲和纯化2A2腹水抗体,获得的单抗浓度为130μg/mL。选取纯化的2A2单克隆抗体进行潜在应用研究,Western blot与间接免疫荧光结果显示,单克隆抗体能与兔多杀性巴氏杆菌分离菌株发生特异性反应。表明利用体外重组表达兔多杀性巴氏杆菌OmpA融合蛋白制成的杂交瘤能够稳定分泌效价高、特异性强的单克隆抗体,可用于兔多杀性巴氏杆菌诊断,本研究结果为兔多杀性巴氏杆菌诊断试剂盒的研制提供技术参数。

关键词： 多杀性巴氏杆菌 外膜蛋白A(OmpA) 重组蛋白 单克隆抗体

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春季水果型黄瓜品种比较试验

陈丽萍; 朱育强; 陈新娟; 张鹏; 周胜军; 《浙江农业科学 》 2012

摘要：对5个水果型黄瓜品种进行春季设施栽培比较试验,对产量,生育期,植物学性状,果实性状和生长势、抗病性等方面进行观察。结果表明,浙秀1号产量最高,第1雌花开花时间最早,座果时间最短,商品性最佳,生长势强并且抗白粉病,可作为东南沿海地区的主推品种。

关键词： 水果型黄瓜 东南沿海地区 春季设施栽培

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稻瘟酰胺在水稻中的残留分析方法及消解动态研究

张昌朋; 赵华; 吴珉; 张春荣; 胡秀卿; 平立凤; 李振; 《浙江农业学报 》 2012 北大核心 CSCD

摘要：为检测水稻中稻瘟酰胺残留及评价其在水稻上使用的安全性,建立了稻瘟酰胺在水稻植株、土壤和田水中的残留分析方法。样品采用乙酸乙酯提取,Florisil小柱净化,气相色谱—电子捕获检测器(GC-ECD)测定。稻瘟酰胺在水稻植株、土壤和田水中的添加浓度为0.05～5.00 mg.kg-1时,平均回收率为74.98%～102.96%,相对标准偏差(RSD)为0.68%～8.07%。稻瘟酰胺在水稻植株、土壤和田水中的最低检测浓度(LOQ)均为0.05 mg.kg-1。田间试验结果表明,稻瘟酰胺在稻田样品中的消解动态符合一级动力学方程,其在水稻植株、土壤和田水的半衰期分别为3.62～5.51 d,3.60～24.32 d,2.29～26.66 d。稻瘟酰胺在水稻植株、土壤和田水中均属易降解农药。

关键词： 稻瘟酰胺 水稻 GC-ECD 残留

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舍内气态及气载有害物质对猪群健康的影响及其控制技术

黄藏宇; 李永明; 徐子伟; 《家畜生态学报 》 2012

摘要：论文综述了猪舍内气态、气载有害物质的种类和危害,介绍了猪舍内空气净化的主要方法。

关键词： 有害气体 微生物气溶胶 粉尘 健康养殖 空气净化

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大棚莴笋高密度越冬栽培技术

杨玉星; 何圣米; 《长江蔬菜 》 2012

摘要：杭州余杭区引进挂丝红、金铭1号、大绿洲、种都5号、竹叶青、三青皮等耐低温、市场适销的莴笋品种进行大棚越冬高密度栽培,产品于春节前后上市,667 m2产值1.44万~1.8万元。栽培过程中注意防止先期抽薹和因低温高湿引发的霜霉病和菌核病。

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不同类型鸭杂交后代肉用性能、脂肪酸组成及含量的研究

田勇; 沈军达; 陶争荣; 王德前; 李国勤; 李进军; 陈黎; 卢立志; 《浙江农业科学 》 2012

摘要：试验选用肉用型北京鸭为公鸭,蛋用型绍兴鸭为母鸭进行杂交繁育,测量杂交一代的肉用性能和肌肉脂肪酸含量。结果表明,杂交一代公鸭与父母代公鸭相比,屠宰率极显著增加,而杂交一代母鸭的大部分屠宰性状显著或极显著高于父母代母鸭,且杂交一代肌肉中多不饱和脂肪酸含量极显著高于父母代,杂交鸭具有良好的杂交优势。

关键词： 鸭 肉用性能 脂肪酸 杂交

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