科研产出
光萼荷属植物SSR反应体系确立与指纹图谱构建
《植物研究 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：利用正交试验设计优化并确立光萼荷属(Aechmea)植物SSR反应体系,构建部分光萼荷属植物的SSR分子指纹图谱。结果表明:光萼荷属植物的最佳SSR反应体系为10μL总体积包括1×PCR buffer、Mg2+2.0 mmol.L-1、dNTPs 200μmol.L-1、引物2.5μmol.L-1、模板DNA 90 ng和Taq DNA聚合酶1.5 U。利用该体系和6对SSR引物对15份光萼荷属植物进行扩增反应和电泳检测,其中M1、M3、M4等3对SSR引物扩增图谱清晰、多态性较高,均能将该15份光萼荷属植物鉴别出来,初步建立了15份光萼荷属植物的SSR分子指纹图谱,进一步证明该SSR反应体系稳定可靠,可以有效用于光萼荷属植物种质资源鉴定。
关键词： 光萼荷属 SSR 正交实验设计 反应体系优化 指纹图谱
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新烟碱类和大环内酯类杀虫剂对四种赤眼蜂成蜂急性毒性和安全性评价
《昆虫学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：为了明确新烟碱类和大环内酯类杀虫剂对天敌赤眼蜂Trichogramma spp.的影响,在室内采用药膜法测定了其对稻螟赤眼蜂Trichogramma japonicum Ashmead、亚洲玉米螟赤眼蜂Trichogramma ostriniae Pang et Chen、拟澳洲赤眼蜂TrichogrammaconfusumViggiani和广赤眼蜂Trichogramma evanescens Westwood成蜂的急性毒性,并进行了安全性评价。急性毒性测定结果表明:在测定的新烟碱类药剂中,噻虫嗪对拟澳洲赤眼蜂和稻螟赤眼蜂表现出最高的急性毒性,其LC50分别为0.24(0.21～0.27)和0.40(0.37～0.44)mga.i./L;其次为烯啶虫胺,该药剂对上述两种赤眼蜂的LC50分别为0.83(0.74～0.96)和0.72(0.65～0.80)mga.i./L;而吡虫啉对亚洲玉米螟赤眼蜂和拟澳洲赤眼蜂的毒性最低,其LC50分别为502.13(459.80～549.62)和752.62(687.51～828.63)mga.i./L。在测定的大环内酯类药剂中,阿维菌素对稻螟赤眼蜂的急性毒性最高,其LC50为0.49(0.46～0.65)mga.i./L,而甲氨基阿维菌素苯甲酸盐对拟澳洲赤眼蜂表现出最低的急性毒性,其LC50为21.76(19.59～24.40)mga.i./L。安全性评价结果表明,吡虫啉、啶虫脒、氯噻啉和甲氨基阿维菌素苯甲酸盐对4种赤眼蜂为低风险～中等风险性,安全性系数为0.57～23.54;噻虫啉和依维菌素对4种赤眼蜂却为中等风险～高风险性,安全性系数为0.16～3.45;而烯啶虫胺、噻虫嗪和阿维菌素对4种赤眼蜂为高风险～极高风险性,安全性系数为0.01～0.15。本研究测定的大部分杀虫剂对赤眼蜂都有一定的急性毒性风险。因此,在害虫综合治理中应谨慎使用新烟碱类和大环内酯类杀虫剂尤其是烯啶虫胺、噻虫嗪和阿维菌素,以免造成对赤眼蜂的大量杀伤。
关键词： 赤眼蜂 杀虫剂 新烟碱类 大环内酯类 毒副作用 卵寄生蜂 急性毒性 安全性评估
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TaqMan探针实时荧光定量PCR检测番茄黄化曲叶病毒
《浙江农业学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：根据番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl virus,TYLCV)外壳蛋白(CP)基因序列上的保守序列,设计特异性的引物和Taqman探针,建立荧光定量PCR方法。结果表明,试验建立的标准曲线循环阈值(Ct值)与模板浓度具有良好的线性关系,相关系数为0.9941;能检测到1 000个病毒拷贝,灵敏度比普通PCR高100倍;与番茄花叶病毒和黄瓜花叶病毒无交叉反应,特异性强、重复性佳,为TYLCV检测提供了一种特异、灵敏、快速的定量检测方法。
关键词： 番茄黄化曲叶病毒 实时荧光定量PCR Taqman探针 定量检测
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猪瘟病毒E0蛋白对IFN-β启动子的抑制作用研究
《江西农业大学学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：以新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)为IFN-β诱导剂,将猪瘟病毒(Classical swine fever vires,CSFV)E0基因的C末端与增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protem,EGFP)基因相连,瞬时表达于猪。肾细胞PK15中,利用荧光素酶报告基因系统检测IFN-β启动子的活化状态,结果显示CSFV E0蛋白可抑制NDV对IFN-β启动子的诱导作用,抑制效应随E0蛋白量增加而增强;半定量RT-PCR结果显示,E0蛋白可明显降低IFN-βmRNA的生成量。结果表明,E0蛋白具有干扰素拮抗功能。该研究为阐明CSFV的致病及持续感染机制提供了理论支持。
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溶菌酶治疗兔大肠杆菌病的研究
《中国兽药杂志 》 2012
摘要：为了有效控制兔大肠杆菌病,开展了溶菌酶临床治疗研究。用溶菌酶对160例经实验室确诊为大肠杆菌病的病兔进行临床治疗对比试验,按患兔症状轻重均匀搭配分为4组,每组40只,溶菌酶组拌料饲喂,4 d为一疗程,与丁胺卡那霉素、氨苄青霉素、氟哌酸组进行疗效比较试验,结果治疗有效率达95%以上,比对照组的治愈率平均高50个百分点。试验表明溶菌酶疗效显著,为治疗兔大肠杆菌病提供了科学依据,对兽医临床用药具有一定的指导意义。
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植物谷胱甘肽转硫酶及其与杂草抗药性的关系
《杂草科学 》 2012
摘要：谷胱甘肽转硫酶(GSTs)是由一个超基因家族编码的广泛存在于好氧生物中的多功能蛋白。GST通常都是成簇地非随机地分布在染色体中。每种植物GSTs家族一般有25～60个成员。根据植物GST序列的相似性、基因结构、蛋白中的活性位点,分成6类(6个家族)。其中Phi类和Tau类是植物特有的常见类型,Zeta和Theta类通常存在于动物中。GST基因尽管在序列和功能上表现很高的多样性,但它们都有相似的空间结构。大部分GST都是胞质型的,通常以二聚体的形式发挥功能,具有亲电疏水性异物谷胱甘肽化酶、谷胱甘肽依赖的异构化酶、谷胱甘肽过氧化物酶和还原毒性有机过氧化物酶等酶学功能,还以非酶学结合的方式来保护植物细胞,例如作为内源性毒物的植物激素或类黄酮类物质的配体(分子伴侣或载体)与GST结合。酶学和非酶学这两种功能都与异物或有毒内源性物质的解毒和防止细胞氧化损伤有关。除草剂的谷胱甘肽化是杂草产生抗药性的机制之一。谷胱甘肽通过过氧化物酶功能消除除草剂造成的氧化逆境而间接参与杂草抗药性。
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手性氟虫腈对意大利蜜蜂和稻螟赤眼蜂的急性毒性及安全评价
《生态毒理学报 》 2012 CSCD
摘要：手性农药多以外消旋体形式用于农业生产和卫生害虫防治中。但手性农药对映体通常具有不同的生物活性和毒性,这种现象在农药环境风险评价过程中往往被忽视。本研究以氟虫腈为例,首先用高效液相色谱-手性固定相(HPLC-CSP)技术拆分出氟虫腈的S型和R型2种对映体,分别采用点滴法和药膜法测定了氟虫腈对映体及外消旋体对意大利蜜蜂(Apis mellifera L.)和稻螟赤眼蜂(Trichogramma japonicum Ashmead)的急性毒性。结果显示,S(+)-氟虫腈、R(-)-氟虫腈和外消旋体对意大利蜜蜂的48h-LD50分别为0.00341、0.00396和0.00383μg·蜂-1,对稻螟赤眼蜂的24h-LR50分别为7.56×10-7、8.06×10-7和7.29×10-7mg·cm-2。研究表明,氟虫腈对意大利蜜蜂具有高毒性风险,对稻螟赤眼蜂有极高毒性风险,且氟虫腈对意大利蜜蜂和稻螟赤眼蜂的急性毒性无明显的对映体选择性。因此,使用氟虫腈单一对映体不会降低其对环境生物的毒害风险。
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两种纤溶酶的酶学性质比较与溶栓机理分析
《中国食品学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：对芽孢杆菌(Bacillus sp.nov.SK006)发酵产生的两种纤溶酶(SPFE-1和SPFE-2)的酶学性质和溶栓机理进行分析比较,并研究其酶促反应动力学参数。试验结果表明:SPFE-1和SPFE-2具有较好的耐热性和pH稳定性;Zn2+能促进SPFE-1的纤溶活力,但强烈抑制SPFE-2;PMSF对SPFE-1h具有强烈的抑制作用;SPFE-1和SPFE-2都可直接降解纤维蛋白,也可激活纤溶酶原,从而间接降解纤维蛋白;SPFE-1最先降解纤维蛋白原的β链,然后是α链,很难降解γ链;SPFE-2顺次降解纤维蛋白原的α、β和γ链;SPFE-1和SPFE-2有较强的酰胺水解活性,最适底物为N-Succ-Ala-Ala-Pro-Phe-pNA;其作用于最佳底物的特征常数:Km=0.6/0.51mmol/L;kcat=712/154.25/s;kcat/Km=1.19×106/3.02×105L/(mol·s)。
关键词： 芽孢杆菌 纤溶酶SPFE-1和SPFE-2酶学性质 纤溶机理 反应动力学
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鸡CACNA1S基因SNPs及其与部分屠体性状的关联性研究
《黑龙江畜牧兽医 》 2012 北大核心
摘要：为了研究L型钙离子通道α1亚单位(CACNA1S)编码基因与动物肌肉收缩和发育的关系,试验采用PCR-SSCP技术,首次对萧山鸡、仙居鸡、灵昆鸡、萧山鸡×仙居鸡杂交F1代、爱拔益加鸡(AA鸡)CACNA1S基因5'-调控区(5'-UTR)和外显子1进行多态性检测,同时结合屠体性状进行关联分析。结果表明:试验群体CACNA1S基因5'-UTR和外显子1存在2个单核苷酸多态性(SNPs)位点与屠体性状关联;SNPs716位点JJ基因型的胸肌率极显著大于KK基因型(P<0.01),SNPs1711位点YY基因型的胸肌率极显著大于XY和XX基因型(P<0.01),YY基因型的半净膛率极显著大于XX基因型(P<0.01)。初步推断CACNA1S基因可能是影响鸡部分屠体性状(全净膛率、半净膛率、胸肌率、腿肌率)的主效基因或与主效基因连锁,并且这些突变位点可能作为分子遗传标记用来选择鸡的屠体性状。
关键词： 鸡 L型钙离子通道α1亚单位(CACNA1S)编码基因 单核苷酸多态性(SNPs) PCR-SSCP 屠体性状 关联分析
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