鲢神经肽Y基因的克隆及其在禁食.恢复投喂条件下的表达特征分析

杨镇宇; 王丹; 李忠; 梁宏伟; 赵金坤; 罗相忠; 邹桂伟; 《水生生物学报 》 2016 北大核心 CSCD

摘要：为深入研究神经肽Y对鲢摄食活动的调节作用,研究利用同源克隆方法获得鲢NPY基因cDNA全长序列,并检测在禁食.恢复投喂条件下,NPY在脑和肝脏中的表达情况.结果表明:鲢NPY基因cDNA全长782 bp,包括5'端非翻译区68 bp,3'端非翻译区423 bp,开放阅读框291 bp,编码96个氨基酸;氨基酸相似性比较和系统进化分析结果显示NPY较为保守;NPY在所检测的13个组织中均有表达,并且在脑垂体中表达量最大;禁食导致NPY mRNA在脑中的表达量显著上升,恢复投喂6h后下降到基本水平,表明NPY鲢摄食有促进作用;在肝脏中,禁食前5天NPY mRNA表达量显著上升,禁食第7天急剧下降,恢复投喂4h后下降到基本水平;NPY mRNA在脑和肝脏中的表达具有组织差异性,其在肝脏中的具体作用机制有待进一步研究.研究结果为探讨NPY鲢中的生物学功能和在遗传育种中的作用提供了理论依据。

关键词： 鲢 NPY基因 禁食 恢复投喂 基因表达

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水产品中汞的形态分析研究进展

陈岩; 王富华; 王旭; 杨慧; 刘永涛; 《食品工业科技 》 2016 北大核心 CSCD

摘要：汞是具有很强毒性的重金属元素,其毒性大小与汞的形态密切相关。水产品是人体摄入汞化合物的主要来源,大量摄入含汞的水产品将对人体健康造成严重的威胁。本文从水产品中汞的主要来源及形态、国内外水产品中汞的卫生标准、样品前处理方法、汞的形态分离与检测技术,以及分析方法验证等方面对近年来汞形态分析研究进行了综述,旨在为水产品质量安全研究提供技术参考。

关键词： 水产品 汞 形态 前处理 分离检测

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哲罗鲑胰岛素样生长因子-I的原核表达及活性鉴定

王晓玉; 徐黎明; 刘淼; 赵景壮; 卢彤岩; 《水产学报 》 2016 北大核心 CSCD

摘要：为进一步了解哲罗鲑IGF-I,实验采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,从哲罗鲑肝脏的总RNA中扩增出胰岛素样生长因子-I(IGF-I)的c DNA开放阅读框(open reading frame,ORF)序列。利用原核表达载体p S构建重组表达质粒(IGF-I/p S),并将其转化到宿主大肠杆菌Rosetta后经IPTG诱导获得重组哲罗鲑IGF-I蛋白。经SDS-PAGE电泳检测,在35~50 ku有条带与预期相符,且重组蛋白以包涵体的形式存在。包涵体经变性/复性实验后,获得纯化的IGF-I融合蛋白。ELISA鉴定结果显示,目的蛋白能特异性识别抗鱼类IGF-I抗体,表明获得了具有免疫活性的哲罗鲑IGF-I蛋白。细胞增殖实验(MTT法)结果显示,重组IGF-I蛋白对大麻哈鱼胚胎细胞(CHSE-214)、鲤上皮细胞(EPC)及虹鳟性腺细胞(RTG-2)均有显著促增殖作用,表明获得的重组IGF-I蛋白具有细胞水平的生物活性。本研究为深入了解IGF-I在哲罗鲑生长发育中的调控机制及绿色高效促生长制剂的研发奠定基础。

关键词： 哲罗鲑 胰岛素样生长因子-I 原核表达 生物活性

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四聚乙醛亚致死剂量对福寿螺AchE、GSTs和MFO活性的影响

张文领; 牟希东; 韦慧; 杨叶欣; 徐猛; 罗渡; 胡隐昌; 《植物保护 》 2016 北大核心 CSCD

摘要：为了解亚致死剂量四聚乙醛对福寿螺的主要靶标酶和解毒酶活性的影响,研究了0.50mg/L的四聚乙醛处理不同时间后福寿螺不同组织中乙酰胆碱酯酶(AchE)、谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)和多功能氧化酶(MFO)的活力变化。结果显示,四聚乙醛对福寿螺具有良好的杀灭效果,96hLC50为3.856mg/L,安全浓度为0.039mg/L;在用0.50mg/L的四聚乙醛处理的24h内,福寿螺鳃和腹足内AchE酶活力分别升高到未处理时的1.565和1.481倍而后下降,肝和肠组织内AchE酶活力分别下降为未处理时的0.132、0.282倍而后升高;不同组织中GSTs酶活力均呈现为"降低—升高—降低"的趋势;不同组织内MFO酶活力均为先下降后上升的趋势。研究表明0.50mg/L的四聚乙醛能诱导AchE、MFO和GST活性不同程度的增加,解毒酶MFO和GSTs可能在四聚乙醛的代谢中起着一定作用。

关键词： 四聚乙醛 福寿螺 亚致死效应 解毒酶系

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重金属Hg~(2+)对菲律宾蛤仔的急性毒性及肝脏组织结构的影响

宫春光; 殷蕊; 孙桂清; 于清海; 杨露梅; 崔健斌; 《科学养鱼 》 2016 北大核心

摘要：重金属随沿岸径流排入海中后,容易在沿海的底泥中沉积,而菲律宾蛤仔为生活在泥沙中的底栖生物,又具有移动性差的特点,因而最易受到重金属的影响;重金属污染物可以在海洋生物体内或其某一组织中积累,通过生物富集和放大,直接或间接威胁人类的健康。在利用生物间的共生互补原理、运用生态学原理创建环境友好型养殖模式中,底栖贝类是一个

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鳜IRAK4基因的克隆、组织表达及病毒感染后表达分析

林强; 杨淞; 李宁求; 方翔; 付小哲; 刘礼辉; 郭慧芝; 李万里; 吴淑勤; 《水产学报 》 2016 北大核心 CSCD

摘要：为了研究鳜IRAK4生物学特性及其在抗病毒免疫应答中的作用,根据鳜转录组数据中筛选出的IRAK4 unigene序列设计引物,利用SMART-RACE技术克隆得到CDS全长为1389 bp的c DNA(命名为Sc IRAK),编码462个氨基酸,含有1个N端死亡结构域和1个保守的中央蛋白激酶结构域。采用荧光定量RT-PCR方法分析了Sc IRAK4在健康鳜各组织中的表达差异及病毒感染后在脾脏中的表达变化,结果显示,健康鳜中Sc IRAK4在肝脏中表达量最大,与其他组织差异显著,而在血液、脑和胃中表达量最低;传染性脾肾坏死病毒(infectious spleen and kidney necrosis virus,ISKNV)感染鳜后Sc IRAK4的表达量呈现下调趋势,24 h脾脏中的表达量达到最低,为对照组的45%;而鳜弹状病毒(siniperca chuatsi rhabdovirus,SCRV)感染鳜后Sc IRAK4的表达量呈现上调趋势,12 h脾脏中Sc IRAK4的表达量达到最高,为对照组的8.17倍,表明Sc IRAK4在抗ISKNV和SCRV的免疫应答中可能发挥不同的作用。本研究为进一步揭示Sc IRAK4的抗病毒免疫反应机制提供了依据。

关键词： 鳜 Sc IRAK4 基因克隆 组织表达

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不同光周期条件下日本牙鲆尾部神经分泌系统转录组分析

陈阿琴; 张影; 陈松林; 吕为群; 《水产学报 》 2016 北大核心 CSCD

摘要：为发掘日本牙鲆响应光周期变化的重要功能基因,采用新一代高通量测序RNA-seq技术分析8L∶16D、12L∶12D和16L∶8D等3个光周期条件下日本牙鲆尾部神经分泌系统(caudal neurosecretory system,CNSS)的基因表达变化。转录组测序结果显示,3个样品分别产生了5 807 622、6 147 140和6 116 872个Clean reads。分别对8L∶16D、12L∶12D和16L∶8D条件下的文库进行两两比较,共获得200个差异表达基因。GO分类分析表明,差异表达基因属于生物学过程、细胞定位和分子功能的42个类别。KEGG Pathway显著性富集分析差异表达基因共涉及29条代谢途径,包括糖酵解/糖异生、钙离子信号转导、血管平滑肌收缩和光信号转导等通路。上述结果不仅加深了对鱼类尾部神经分泌系统功能的认识,也为进一步探索硬骨鱼类光信号转导机制提供了多方面多层次的信息。

关键词： 日本牙鲆 尾部神经分泌系统 光周期 转录组

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碱性过硫酸钾氧化法-紫外分光光度法测定养殖海水中总氮量

时旭; 朱林; 程果锋; 王小冬; 吴宗凡; 刘兴国; 《理化检验(化学分册) 》 2016 北大核心 CSCD

摘要：以国家标准GB/T 12763.4-2007中的碱性过硫酸钾氧化法和GB/T 11894-1989中淡水总氮测定的紫外分光光度法为基础对海水总氮测定方法进行了改进。在改进的方法中减少了物质转化步骤,相应减少了样品转移次数与定量移取步骤。该方法测定总氮量的线性范围在57.74mg·L-1(以KNO3计)以内。该方法的有机氮物质氧化率为(99.1±5.6)%,加标氧化率为(100.4±4.2)%,以海水样品为基体的加标回收率为(107.3±15.3)%。对海水样品及20,40μmol·L-1硝酸钾标准溶液的测得结果与已知值无显著差异。

关键词： 紫外分光光度法 碱性过硫酸钾氧化法 养殖海水 总氮

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美洲红点鲑、白斑红点鲑及杂交后代遗传分析

谷伟; 郭媛; 户国; 孙鹏; 白庆利; 王炳谦; 《东北农业大学学报 》 2016 北大核心 CSCD

摘要：以美洲红点鲑和白斑红点鲑双列杂交F1及其自交形成的4个群体为试验材料,利用7对微卫星引物分析遗传结构。结果表明,7对引物均表现良好多态性,可作4个群体遗传结构分析;各组合PIC平均值0.5079~0.6467,属高度多态性;有效等位基因数4.3688~5.5764;平均观测杂合度0.6857~0.7143,平均期望观测杂合度0.6290~0.8234,杂交组中杂合度高于双亲,均显示子代高遗传变异水平;4个群体中,美洲红点鲑纯繁群体(AA)和美白杂交群体(AB)间遗传距离最大(0.757343),最小遗传距离(0.366335)。UPGMA系统树显示,美白杂交群体(AB)和白美杂交群体(BA)亲缘关系最近,与白斑红点鲑纯繁群体(BB)聚为一类,达到改良目的,为分子标记辅助选育奠定基础。

关键词： 美洲红点鲑 白斑红点鲑 微卫星标记

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急性温度胁迫对银鲳幼鱼代谢酶、离子酶活性及血清离子浓度的影响

高权新; 谢明媚; 彭士明; 张晨捷; 施兆鸿; 《南方水产科学 》 2016 北大核心 CSCD

摘要：为探明急性温度胁迫对银鲳(Pampus argenteus)幼鱼生化指标的影响,该实验设计了3个温度梯度,即22℃、27℃和32℃,以27℃为对照组,胁迫时间48 h,分别测定胁迫前后其代谢酶、离子酶活性以及血清中离子浓度。结果显示,2个实验组的血清谷丙转氨酶(GPT)的变化趋势相反,肝脏谷草转氨酶(GOT)的变化趋势也不同;2个实验组的碱性磷酸酶(AKP)变化趋势相反,而酸性磷酸酶(ACP)变化趋势相同,乳酸脱氢酶(LDH)在22℃实验组出现波浪式变化(P<0.05);血清钠(Na+)、钾(K+)、氯(Cl-)、钙(Ca2+)在各组呈现不同的变化趋势;鳃Na+/K+-ATP酶活性在32℃实验组出现下降趋势,肾脏Na+/K+-ATP酶活性在22℃实验组出现先升高后降低趋势(P<0.05);2个实验组鳃Ca2+/Mg2+-ATP酶活性和肾脏Ca2+/Mg2+-ATP酶活性皆出现相反的变化趋势。结果表明,急性温度胁迫可显著影响银鲳幼鱼的正常代谢,因此在养殖过程中应尽量避免温度胁迫,以使其有一个良好的生长环境。

关键词： 急性温度胁迫 银鲳幼鱼 代谢酶 离子酶 血清离子浓度

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