牛分枝杆菌抗原MPB70、MPB83和ESAT-的融合表达及重组蛋白的初步应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 郭设平

作者： 郭设平;刘思国;张秀华;王春来;宫强;郭洋;邵美丽

作者机构：

关键词： 牛分枝杆菌;融合表达;ELISA

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2006 年 37 卷 7 期

页码： 676-680

收录情况： CSCD

摘要： 应用PCR方法从牛分枝杆菌Vallee株基因组中扩增获得mpb70、mpb83和esat-6三个目的基因片段。采用重叠延伸剪接技术（splicing by overlap extension，SOE）获得融合基因mpb70-mpb83后，将mpb70-mpb83和esat-6串连于同一表达载体pET32a（＋）中得到重组质粒pET70-83-E6。转化BL21（DE3）大肠杆菌感受态后，经IPTG诱导以可溶的形式表达融合蛋白。用Ni^2＋亲合层析的方法纯化该融合蛋白。Western blot分析显示：该融合蛋白能与抗牛分枝杆菌阳性血清发生特异性反应，而与牛副结核病阳性血清不反应。用该纯化蛋白初步建立了间接ELISA方法，并检测了117份临床血清样本（其中67份为PPD阳性牛血清），阳性率为39．32％（46／117）份，与PPD皮试诊断的符合率为82．05％（96／117）。

分类号：

  • 相关文献

[1]牛分枝杆菌抗原MPB70、MPB83和ESAT-6的融合表达及重组蛋白的初步应用. 郭设平,刘思国,张秀华,王春来,宫强,郭洋,邵美丽. 2006

[2]牛分枝杆菌MPB83基因的原核表达及免疫活性分析. 张秀华,刘思国,王春来,郭设平,郭洋,邵美丽,宫强,彭永刚,沈国顺. 2005

[3]黑曲霉葡萄糖氧化酶基因的原核表达及其蛋白产物的Western-blot分析. 安玉麟,孙瑞芬,张鹤龄,郭树春,闫素丽. 2009

[4]传染性法氏囊病病毒VP3抗原表位的鉴定. 邓小芸,高玉龙,高宏雷,祁小乐,王晓艳,王笑梅. 2007

[5]牛分枝杆菌二价组合及融合DNA疫苗的免疫效果. 宫强,刘思国,王春来,刘慧芳,刘建东,施远祥,阿曼古丽,孔宪刚. 2009

[6]不同牛分枝杆菌特异性基因PCR方法的比较. 张春燕,秦玉明,边增杰,徐中清,牛凯,许冠龙,丁家波,鑫婷,朱良全. 2020

[7]牛分枝杆菌重组蛋白TB27.4的表达、纯化及活性鉴定. 高新桃,李平俊,鑫婷,贾红,郭晓宇,张改梅,李明,刘淑清,朱鸿飞. 2014

[8]牛分枝杆菌肉芽肿形成机理的研究进展. 于有利,黎玉琼,薛峰. 2023

[9]鸟苷酸结合蛋白2b在牛分枝杆菌诱导巨噬细胞极化过程中的作用. 于有利,王建东,郭亚男,张久盘,薛峰,曹钰莹. 2024

[10]牛分枝杆菌外膜蛋白基因ompA的原核表达及免疫活性分析. 亓英芳,黄瑛,杜艳芬,刘慧芳,赫明雷,司微,倪洪波,王春来,刘思国. 2009

[11]牛分枝杆菌单基因及双价融合基因DNA疫苗免疫效果的研究. 宫强,刘思国,王春来,王勇,刘建东,迟磊,赵昆,周媛媛,常月红,云孟克,孔宪刚. 2007

[12]牛分枝杆菌mpb64-ag85b-esat-6融合基因真核表达载体的构建及其在SP2/0细胞中的表达. 宫强,刘思国. 2008

[13]11种牛分枝杆菌抗原在牛结核病诊断中的初步评价. 高新桃,贾红,侯绍华,杨宏军,郭晓宇,袁维峰,姜一曈,朱鸿飞,鑫婷,丁家波. 2018

[14]牛分枝杆菌mpb64和Ag85B融合基因在大肠埃希氏菌中的原核表达. 郭设平,刘思国,王春来,邵美丽,宫强,刘建东. 2005

[15]牛分枝杆菌PPE68与Mb1230以及PPE57和PE-PGRS35的表达纯化及其在牛结核病血清学诊断中的初步应用. 李明,张雅娜,林伟东,隋修锟,贾红,侯绍华,姜一曈,房立春,朱鸿飞,鑫婷. 2019

[16]牛分枝杆菌mpb64基因的克隆、鉴定及其表达. 张秀华,刘思国,宫强,王春来,王牟平,彭永刚,沈国顺,郭洋,郭设平. 2005

[17]牛结核分枝杆菌ESAT-6蛋白的原核表达和纯化. 徐志光,许礼义,呼西旦,宋振忠,徐敏. 2010

[18]牛分枝杆菌Spoligotyping和VNTR-MIRU的基因分型研究. 杜艳芬,林靖凯,刘思国,王春来,刘慧芳,司微,王聃,赵海玲. 2009

[19]牛分枝杆菌esat6和cfp10蛋白的表达及在临床检测中的应用. 解晓莉,韩猛,刘来兴,王基隆,杨美,张云飞,丁家波,张亮,杨宏军. 2017

[20]鸟苷酸结合蛋白5在牛分枝杆菌诱导巨噬细胞极化过程中的作用. 刘梦婷,于有利,潘家良,黄群涛,王洪生,任建鸾,汤芳,戴建君,薛峰. 2023

作者其他论文 更多>>

微信小程序