新型杀虫基因cry39A-like和cry40-like的克隆、表达与活性分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 丰硕

作者： 丰硕;黄国强;程佳旭;曹伟平;宋健

作者机构：

关键词： 苏云金芽胞杆菌;cry39A-like;cry40-like;韭菜迟眼蕈蚊;杀虫活性

期刊名称： 中国生物防治学报

ISSN： 2095-039X

年卷期： 2024 年 40 卷 006 期

页码： 1406-1413

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 韭菜迟眼蕈蚊是农业上重要难防地下害虫，其幼虫对韭菜等多种作物造成严重为害，研究室前期筛选到1株在室内和田间均对韭菜迟眼蕈蚊幼虫具有高毒力的Bt菌株，但菌株的杀虫蛋白类型尚不明确。本研究对Bt菌株进行了全基因组测序，发现cry39A-like和cry40-like两个新型杀虫基因。通过设计特异性引物和PCR获得基因的全长序列，利用生物信息学软件开展序列分析，构建pGS21T表达载体，转入大肠杆菌Rosetta(DE3)表达，最后测定表达蛋白对韭菜迟眼蕈蚊幼虫杀虫活性。结果表明，cry39A-like开放阅读框为1986 bp，编码661个氨基酸，与cry39Aa1亲缘关系最近，氨基酸序列相似性为94.10%，属于第三分类等级，Cry39A-like蛋白大小为76 kDa，对韭菜迟眼蕈蚊幼虫具有杀虫活性，LC50为89.42μg/mL;cry40-like开放阅读框为2001 bp，编码666个氨基酸，与Cry40类聚在一支，亲缘关系最近，氨基酸序列相似性最高为70.88%，属于第二分类等级，Cry40-like蛋白大小为74.5 kDa，对韭菜迟眼蕈蚊幼虫具有杀虫活性，LC50为126.83μg/mL。本研究明确了Bt菌株主要杀虫基因，cry39A-like和cry40-like可作为新型杀虫基因资源在韭菜迟眼蕈蚊的生物防治中应用。

分类号： S476

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