稳定表达鼠源整联蛋白αvβ6的CHO-677细胞系的构建

文献类型： 中文期刊

第一作者： 朱志坚

作者： 朱志坚;连凯琪;杨帆;张伟;郑海学;杨孝朴

作者机构：

关键词： FMDV;整联蛋白受体;αvβ6;细胞系

期刊名称： 中国生物工程杂志

ISSN： 1671-8135

年卷期： 2015 年 35 卷 08 期

页码： 23-29

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 口蹄疫是由口蹄疫病毒(FMDV)引起的一种高度接触性传染病,主要侵害偶蹄动物。乳鼠常作为一种重要的实验动物模型用于FMDV的研究;整联蛋白αvβ6是FMDV的重要受体之一。为深入研究整联蛋白αvβ6在FMDV感染乳鼠中所发挥的作用,克隆了乳鼠整联蛋白αvβ6的两个亚基,并将其导入中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary,CHO-677)基因组中,构建了稳定表达乳鼠整联蛋白αv和β6亚基的细胞系CHO-677-mαvβ6,并分别选用两种不同血清型的野生型FMDV毒株Asia1/HN/CHA/06和O/BY/CHA/2010感染细胞系来分析细胞系对FMDV的易感性。首先通过PCR和间接免疫荧光试验证明了细胞系中整联蛋白αvβ6在基因水平成功导入,在蛋白水平成功表达。然后,通过实时荧光定量RT-PCR检测病毒RNA拷贝数,并结合TCID50试验测定了代表毒株在两个细胞上的生长曲线。结果表明,与亲本细胞CHO-677相比,细胞系CHO-677-mαvβ6对FMDV更易感,从αvβ6的功能性上进一步验证了细胞系被成功构建。

分类号： S852.65

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[1]稳定表达鼠源整联蛋白αｖβ６的ＣＨＯ-６７７细胞系的构建. 朱志坚１,２　连凯琪２　杨　帆２　张　伟２　郑海学２　杨孝朴１. 2015

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