牛分枝杆菌mpb64和Ag85B融合基因在大肠埃希氏菌中的原核表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 郭设平

作者： 郭设平;刘思国;王春来;邵美丽;宫强;刘建东

作者机构：

关键词： 牛分枝杆菌;融合基因;原核表达

期刊名称： 中国兽医科技

ISSN： 1000-6419

年卷期： 2005 年 35 卷 12 期

页码： 946-949

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以牛分枝杆菌Vallee株基因组DNA为模板,应用PCR扩增获得mpb64和Ag85B两个目的基因片段,采用重叠延伸剪接技术(SOE)剪接mpb64和Ag85B,得到融合基因mpb64-Ag85B;将融合基因片段先克隆于pMD 18-T载体,再亚克隆到表达载体pET32a(+)中,得到重组质粒pET64-85。该重组质粒经核苷酸序列测定,显示其中的外源片段与期望的序列一致;其BL21(DE3)转化菌经IPTG诱导表达带有6个组氨酸标签的融合蛋白;用Ni2+螯合层析方法纯化融合蛋白,Western-blotting分析结果显示,该融合蛋白能与抗牛分枝杆菌阳性血清发生反应。

分类号： S852.618

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