启动子p7.5/p11在山羊痘病毒和羊口疮病毒中的启动功能验证

文献类型: 中文期刊

第一作者: 李继东

作者: 李继东;朱学亮;李辉;骆学农;窦永喜

作者机构:

关键词: 山羊痘病毒;羊口疮病毒;启动子;p7.5;p11

期刊名称: 中国预防兽医学报

ISSN: 1008-0589

年卷期: 2014 年 36 卷 11 期

页码: 829-833

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为验证痘苗病毒启动子p7.5/p11在山羊痘病毒(GPV)和羊口疮病毒(ORFV)中的启动功能,本研究通过p TKpp质粒以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因,构建含有p7.5/p11-GFP表达盒的重组质粒p TKp-gpt-i-GFP-p和p TKpp-H-i-GFP,将其利用脂质体转染预感染GPV或ORFV的羔羊睾丸(LT)细胞中。结果显示,两种重组质粒转染LT细胞24 h后均可以检测到绿色荧光,表明p7.5/p11均能够有效的启动目的蛋白的瞬时表达。同时,构建用于GPV重组的通用转移载体p TKfpgigp,将含有小反刍兽疫病毒(PPRV)的F基因的重组质粒p TKfpgigp-F与GPV共转染LT细胞,经同源重组制备表达PPRV F基因的重组GPV(r GPV)。结果显示,r GPV在感染的LT细胞中F基因能够稳定表达。结果证明,痘苗病毒启动子p7.5和p11均能够被GPV或ORFV编码的RNA聚合酶所识别,从而启动外源目的基因的表达。因此,p7.5和p11可以用于表达外源基因的GPV或ORFV重组病毒的构建。

分类号: S852.65

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