文献类型: 中文期刊
第一作者: 姜涛
作者: 姜涛;刘越;孔秀英;贾继增
作者机构:
关键词: 细菌人工染色体;BAC;文库;载体DNA;制备;酶切;脱磷;凝胶回收纯化
期刊名称: 遗传学报
ISSN: 0379-4172
年卷期: 2002 年 29 卷 12 期
页码: 1126-1131
收录情况: CSCD
摘要: 细菌人工染色体(BAC)文库在基因组研究中起着关键作用。构建BAG文库的一个关键步骤就是BAC载体DNA的制备,制备高质量的BAC载体DNA受到包括酶切,脱磷等诸多因素的影响。以BAC载体pECBAC1为材料,分别采用限制性内切酶BamHⅠ和HK脱磷酶对其进行酶切和脱磷,并结合凝胶回收缩化技术,制备了可用于进一步构建BAC文库的线性载体DNA。并在此基础上,确定了制备BAC载体DNA的适宜条件,其中包括确定适宜限制内切酶用量及酶切时间,脱磷酶种类及浓度和凝胶回收纯化线性载体DNA等关系步骤。
分类号:
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