日本血吸虫中国大陆株雌、雄成虫cDNA文库的构建

文献类型： 中文期刊

第一作者： 苑纯秀

作者： 苑纯秀;李铭;陈永军;石耀军;吴祥甫;蔡幼民;林矫矫

作者机构：

关键词： 日本血吸虫;雌、雄成虫cDNA文库

期刊名称： 生物工程学报

ISSN： 1000-3061

年卷期： 2000 年 16 卷 06 期

页码： 67-70

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 用TRIZOL试剂盒分别提取日本血吸虫中国大陆株雌、雄成虫总RNA ,Oligo(dT)纤维素柱纯化mRNA ,反转录合成第一链cDNA ,完成第二链cDNA合成后 ,凝胶电泳回收 5 0 0bp以上的片段并过柱纯化后 ,与载体λZipLox连接。体外包装后分别得到雌、雄成虫cDNA噬菌体表达文库。经测定雌、雄文库容量分别为 3 74× 10 6、3 2 8× 10 6,重组比率均在 96 %以上 ,插入片段长度多在 1kb左右。通过PCR技术 ,我们从文库中钓取到EGP、2 3kD膜蛋白、Actin和GCP的cDNA ,其中GCP基因为低丰度表达基因。各项指标表明 ,我们成功构建了高质量的cDNA文库 ,可作为研究雌雄成虫基因差异及筛选保护性抗原基因的重要资源

分类号： Q785

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