鸡传染性法氏囊病病毒Gt株VP5基因缺失株感染性克隆的构建

文献类型： 中文期刊

第一作者： 秦立廷

作者： 秦立廷;祁小乐;高玉龙;高宏雷;步志高;王笑梅

作者机构：

关键词： 传染性法氏囊病病毒;VP5;感染性克隆;重组病毒

期刊名称： 微生物学报

ISSN： 0001-6209

年卷期： 2008 年 48 卷 12 期

页码： 1666-1670

收录情况： CSCD

摘要： 传染性法氏囊病病毒（IBDV）是双链，双节段RNA病毒，其基因组由A、B两个节段组成，编码结构蛋白VP1-VP4和非结构蛋白VP5。【目的】利用反向遗传操作构建拯救VP5基因缺失重组IBDV。【方法】利用体外定点突变技术，缺失IBDVGt株VP5基因，通过多重PCR在基因组两端分别引入锤头状核酶序列（HamRz）和丁肝病毒核酶序列（HdvRz）。将带有核酶序列的IBDV基因组插入载体pCAGG的13肌动蛋白启动子下游，构建了IBDV感染性克隆pCAGGmGtAΔVP5HRT，将该感染性克隆与pCAGGmGtBHRT共转染DFI细胞。【结果】RT-PCR和间接免疫荧光均显示获得重组病毒，将其命名为rmGtAΔVP5。IBDV VP5基因缺失感染性克隆的成功构建为从分子水平上深入研究vp5基因功能奠定了基础。

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