鸡传染性支气管炎病毒H120疫苗株全长cDNA感染性克隆的构建

文献类型： 中文期刊

第一作者： 周生

作者： 周生;戴亚斌;唐梦君;刘梅;程旭;吕晓娟

作者机构：

关键词： 传染性支气管炎病毒;H120疫苗株;感染性克隆;病毒拯救

期刊名称： 中国家禽

ISSN： 1004-6364

年卷期： 2010 年 32 卷 23 期

页码： 22-26

收录情况： 北大核心

摘要： 根据鸡传染性支气管炎病毒(IBV)H120疫苗株的全基因组序列设计引物,采用RT-PCR方法对其基因组分10个片段进行扩增,并克隆至pMD19-T载体中进行测序。经BsaⅠ限制性内切酶酶切后,采用优化的连接策略将各DNA片段进行连接,获取H120株的基因组全长cDNA,其5′端具有完整的T7RNA聚合酶启动子的核心序列,3′端具有polyA尾巴结构。通过T7RNA聚合酶体外转录系统合成病毒基因组RNA,转染BHK-21细胞并进行病毒拯救。采用RT-PCR、测序及鸡胚传代对拯救出的病毒株进行鉴定。结果表明成功地从H120株的基因组全长cDNA拯救出病毒H120-R株,为进一步开展该病毒的分子致病机理研究、新型疫苗的研制等奠定了基础。

分类号： S852.65

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