小反刍兽疫病毒H基因胞外区的表达与分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 蒙学莲

作者： 蒙学莲;窦永喜;朱学亮;骆学农;才学鹏

作者机构：

关键词： 小反刍兽疫病毒;H基因;原核表达;真核表达

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2014 年 11 期

页码： 1134-1139

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了掌握小反刍兽疫病毒(PPRV)H蛋白胞外区的功能,根据GenBank中已发表的小反刍兽疫病毒Nigeria 75/1株的H基因序列设计相应引物,分别克隆tH基因后构建原核表达载体pET-30a(+)-tH和真核表达载体pPIC9K-tH。将测序正确的重组质粒分别转化至大肠杆菌BL21(DE3)和酵母菌GS115,而后进行诱导表达。SDS-PAGE分析结果显示,tH蛋白均获得了高效表达,融合蛋白的分子质量约为60ku,原核表达产物以包涵体的形式存在,其表达产量为4.68g/L,而目的蛋白的真核表达产量为0.5~1g/L。Western-blot分析表明,所表达的重组蛋白能被抗PPRV Nigeria 75/1株的阳性家兔血清特异性识别。结果表明,成功表达了小反刍兽疫病毒H基因胞外区,重组表达蛋白具有良好的反应原性,这为PPRV H蛋白与其受体相互作用功能区的确定奠定了基础。

分类号： S852.659.5

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