重组小反刍兽疫病毒血凝素蛋白纯化体系的优化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 胡林杰

作者： 胡林杰;朱学亮;彭泓蛟;邓瑞雪;潘春容;孙跃峰;蒙学莲

作者机构：

关键词： 小反刍兽疫病毒;血凝素蛋白;蛋白纯化;优化

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN：

年卷期： 2024 年 001 期

页码： 79-86

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本试验利用发酵技术诱导表达了小反刍兽疫病毒H蛋白胞外区（PPRV tH），优化建立了一套纯化重组PPRV tH的完整工艺体系。通过发酵表达获得的10 L菌液，菌体湿重约达30 g/L，均质机破碎菌体获得包涵体；Tris-0缓冲液（pH=8.0）洗涤包涵体3次，每1 g包涵体加入5 m L含20 mmol/L咪唑的Tris-E缓冲液（pH=8.0）重悬，4℃温和旋转溶解过夜，离心收集上清；按体积比1∶2将层析填料Chelaing Sepharose Fast Flow与上清混匀，以流速1～2 m L/min加入层析柱；依次通过10倍柱体积含50、100、400和500 mmol/L咪唑的Tris-E缓冲液（pH=8.0）,4℃静置2 h进行洗脱。优化后的纯化体系可得到较纯的重组PPRV tH蛋白，利用灰度分析可知纯化后的重组PPRV tH蛋白纯度能达到85%。本试验提供的纯化体系可快速、简便、低成本、大批量纯化重组PPRV tH蛋白，而且纯化获得的PPRV tH蛋白具有良好的反应原性。

分类号： S852.65

  • 相关文献

[1]小反刍兽疫病毒H蛋白的原核表达及免疫原性测定. 李丹,宋浩志,高维崧,刘兴健,张志芳,李轶女. 2021

[2]犬瘟热病毒囊膜糖蛋白在杆状病毒-昆虫细胞系统中的表达及鉴定. 虞一聪,冯娜,闫飞虎,盖微微,王铁成,王化磊,郑学星,赵永坤,黄耕. 2015

[3]核酸免疫制备抗猪流感病毒HA单克隆抗体. 李越,王伟,赵颖慧,周长良,臧凤霞,冉多良,孟庆文,陈洪岩. 2014

[4]H7N9亚型流感病毒特异性中和抗体的筛选及其表位的鉴定. 申汶涛,王倩,王正祥,朱启运,徐帅. 2023

[5]小反刍兽疫病毒血凝素蛋白与受体蛋白SLAM的相互作用. 蒙学莲,窦永喜,朱学亮,骆学农,才学鹏. 2014

[6]水貂狐狸及貉源犬瘟热病毒H基因的克隆与序列分析. 朱春生,赵建军,白雪,张海玲,胡博. 2014

[7]表达犬瘟热病毒H基因重组新城疫病毒的构建及其免疫原性研究. 田美杰,葛金英,王喜军,冯娜,马良,帅磊,苏华,高玉伟,夏咸柱,步志高. 2012

[8]小反刍兽疫病毒蛋白及其功能研究进展. 杭柏林,胡建和,姚四新,王宪文,王丽荣,王选年,刘兴友. 2009

[9]快速检测小反刍兽疫病毒RT-LAMP方法的建立. 李伟,李刚,范晓娟,张坤,贾风琴,史利军,Hermann Unger. 2009

[10]西藏株小反刍兽疫病毒H蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备. 于瑞嵩,高位相,李凤平,董世娟,李震. 2018

[11]小反刍兽疫活疫苗研究进展. . 2019

[12]小反刍兽疫病毒N蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备. 周岩岩,李玲霞,吴锦艳,余树芳,李娇阳,刘丹,冯倩,孙晶晶,何苗,魏凡华,尚佑军. 2019

[13]绵羊肺炎支原体和小反刍兽疫病毒双重RT-PCR检测方法的建立. 霍晓丽,李文良,毛立,杨蕾蕾,刘茂军,张纹纹,李基棕,孙敏. 2020

[14]小反刍兽疫病毒受体细胞系的构建及应用. 金红岩,封家旺,梁琳,赵玲娜,隋修锟,史利军,侯绍华,李刚. 2017

[15]小反刍兽疫病毒H蛋白抗体化学发光免疫分析检测方法的建立. 钱榜,刘振东,赵印,李静,PRAJAPATI Meera,李彦敏,孙跃峰,窦永喜. 2023

[16]小反刍兽疫病毒致病机制研究进展. 刘振东,孙跃峰,朵红,窦永喜. 2023

[17]小反刍兽疫病毒F基因真核载体的构建与表达. 朱学亮,张强,杨帆,窦永喜,骆学农,岳城,才学鹏. 2009

[18]小反刍兽疫病毒N蛋白单克隆抗体的制备及其阻断化学发光抗体检测方法的建立. 刘丹,周广青,吴锦艳,曹小安,李玲霞,杜国玉,兰喜,刘永生,尚佑军. 2021

[19]小反刍兽疫病毒N基因部分片段克隆表达及鉴定. 祁光宇,刘斌,陈晓宇,王赛错,苟慧天,黄银君,穆克斌,刘学荣. 2013

[20]小反刍兽疫研究概况. 李林,才学鹏,孟庆玲,乔军. 2011

作者其他论文 更多>>

微信小程序