猪分泌型免疫球蛋白A分泌成分SC单克隆抗体的制备与鉴定
文献类型: 中文期刊
第一作者: 李璐瑶
作者: 李璐瑶;曹丽艳;毛文权;张宇;张娟;郑海学;郭庆勇;王琦
作者机构:
关键词: SC蛋白;原核表达;单克隆抗体;sIgA
期刊名称: 中国兽医科学
ISSN: 1673-4696
年卷期: 2025 年 55 卷 008 期
页码: 1065-1070
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为解析分泌型免疫球蛋白A(sIgA)中特有成分SC蛋白的结构和功能,通过PCR扩增猪SC基因的跨膜区,克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,经测序验证后,诱导表达重组SC蛋白,用镍柱亲和层析纯化的重组SC蛋白免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合技术筛选出能够稳定分泌抗SC蛋白的细胞株,采用免疫荧光试验和Western-blot验证单抗特异性。结果表明,成功获得分子质量约72 k Da的重组SC蛋白;筛选出2株效价高达1∶32 000的单抗细胞株(3F7A9和6F10E11)。结论:成功表达了SC蛋白,并制备出了抗SC蛋白的单克隆抗体,为研究SC蛋白的结构特性、功能作用以及构建高效、快速的sIgA抗体检测方法奠定了实验基础。
分类号: S852.4
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