羊痘野毒感染与弱毒免疫iELISA鉴别诊断方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李慧霞

作者： 李慧霞;朱学亮;刘振勇;窦永喜;李辉;骆学农;才学鹏

作者机构：

关键词： 山羊痘病毒;绵羊痘病毒;ORF95基因;ORF103基因;间接酶联免疫吸附试验

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2013 年 07 期

页码： 701-706

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立一种方便、灵敏、有效的检测羊痘野毒感染的iELISA方法,以山羊痘病毒基因组DNA为模板,PCR扩增获得ORF95和ORF103基因的完整ORF,连接至克隆载体pMD18-T。测序正确后,将两基因片段分别与表达载体pET-30a(+)连接,构建原核表达载体pET-95和pET-103,转入BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导,SDS-PAGE分析后,用纯化的两种重组蛋白进行iELISA方法研究。结果显示,ORF95和ORF103大小分别为483bp和570bp,重组菌经1mmol/L IPTG诱导5h后,分别在30ku和35ku处有高水平的融合表达,且均以包涵体形式存在。两种目的蛋白以10ng+20ng混合作为包被抗原时,该iELISA方法检测羊痘自然感染血清、弱毒疫苗免疫羊血清和阴性血清的D450nm有明显差异,且与口蹄疫病毒、小反刍兽疫病毒、羊口疮病毒无交叉反应。因此,该方法能有效排除羊痘弱毒疫苗免疫造成的干扰,可特异性检测羊痘野毒感染的血清样品。

分类号： S855.3

  • 相关文献

[1]两种用于鉴别山羊痘病毒和绵羊痘病毒方法的应用与比较研究. 颜新敏,张强,吴国华,李健,朱海霞. 2009

[2]绵羊痘病毒ORFL21基因的序列分析及其B细胞表位预测. 陈轶霞,乔自林,刘俊林,王明明,陆会宁,郑亚东,陈智华. 2009

[3]绵羊痘病毒RP030基因的克隆及序列分析. 赵志荀,吴国华,颜新敏,李健,朱海霞,孙晓林,张强. 2011

[4]绵羊痘病毒ORF121基因的序列分析及其B细胞表位预测. 陈轶霞,乔自林,刘俊林,王明明,陆会宁,郑亚东,陈智华. 2009

[5]绵羊痘病毒E3L蛋白N端结构和功能预测. 卢昌,吴国华,颜新敏,赵志荀,于少雄,叶奕优,朱海霞,李健,张强. 2013

[6]绵羊痘病毒甘肃流行株糖蛋白基因orf118的克隆及序列分析. 张冬峰,郑亚东,骆学农,王晓霞,陈轶霞,李辉,侯俊玲,潘晓梅,刘琼,景志忠,岳城,才学鹏. 2008

[7]绵羊痘病毒甘肃流行株糖蛋白基因orf118的克隆及序列分析. 张冬峰,郑亚东,骆学农,王晓霞,陈轶霞,李辉,侯俊玲,潘晓梅,刘琼,景志忠,岳城,才学鹏. 2008

[8]绵羊痘病毒E3L基因在Vero细胞中的表达. 于少雄,颜新敏,赵志荀,吴国华,叶奕优. 2014

[9]绵羊痘病毒甘肃流行株膜蛋白ORF23基因的克隆及序列分析. 张冬峰,郑亚东,骆学农,王晓霞,陈轶霞,李辉,侯俊玲,景志忠,才学鹏. 2009

[10]绵羊痘病毒甘肃流行株ORF121基因的克隆及序列分析. 陈轶霞,才学鹏,郑亚东,张冬峰,骆学农,乔自林. 2009

[11]感染绵羊痘病毒的绵羊睾丸细胞外泌体源性蛋白组学分析. 吴金恩,郑亚东,孔贺磊,刘晓娟,马正海,丁军涛. 2018

[12]绵羊痘病毒固原株的分离与鉴定. 王曼,叶奕优,赵志荀,吴国华,颜新敏,朱学亮,李应国,朱海霞,李健,张强. 2015

[13]绵羊痘病毒RPO30基因的克隆及序列分析(英文). 赵志荀,吴国华,颜新敏,李健,朱海霞,张强. 2011

[14]绵羊痘病毒新疆株的分离及结构蛋白P32基因序列分析. 魏婕,薛英,苗书魁,窦小龙,任晓冰,马文戈,黄炯. 2015

[15]绵羊痘病毒A11R基因的优化表达及抗体间接ELISA方法的建立. 朱学亮,赵志荀,蒙学莲,曾巧英. 2022

[16]绵羊痘病毒RPO30基因的克隆及序列分析. 赵志荀,吴国华,颜新敏,李健,朱海霞,张强. 2011

[17]绵羊痘病毒RPO30基因的克隆及序列分析(英文). 赵志荀,吴国华,颜新敏,李健,朱海霞,张强. 2011

[18]绵羊痘病毒甘肃流行株糖蛋白基因ORF117的克隆及其原核表达. 王晓霞,郑亚东,骆学农,陈轶霞,李辉,侯俊玲,于三科,才学鹏. 2009

[19]绵羊痘病毒研究综述. 颜新敏,张强. 2010

[20]绵羊痘病毒E3L基因的克隆和表达及其结构分析. 于少雄,颜新敏,吴国华,赵志荀,卢昌. 2013

作者其他论文 更多>>

微信小程序