犬瘟热病毒H基因5'端的表达纯化及抗原性分析

文献类型: 中文期刊

第一作者: 易立

作者: 易立;程世鹏;金卉;王建科;许红丽;杨莘

作者机构:

关键词: 犬瘟热病毒;H基因5'端;表达纯化;抗原性分析

期刊名称: 特产研究

ISSN: 1001-4721

年卷期: 2011 年 33 卷 03 期

页码: 6-9

摘要: 为了获得高纯度的犬瘟热病毒5'端H蛋白,本研究通过参考GenBank中发表的CDV H蛋白基因序列,用Oligo 6.0软件设计一对特异性引物,从犬瘟热病毒疫苗毒株CDV3和野毒株CDVSD株提取总RNA,经RT-PCR扩增得到388bp的基因片段,将目的基因与原核表达载体pET28a(+)连接构建了pET28a-CDV3-H5和pET28a-CDVSD-H5重组质粒,转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行鉴定、测序I、PTG诱导表达。重组表达载体pET28a-CDVSD-H5在大肠杆菌中成功的表达,目的重组蛋白为22kD,而pET28a-CDV3-H5未能表达。经Ni-NTA洗脱纯化后r,CDVSD-H5蛋白被成功纯化。Western blot分析表明,表达产物能够被犬抗CDV阳性血清所识别,具有良好的抗原性。为血清学诊断方法的建立和基因工程疫苗的研究奠定基础。

分类号: S852.65

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