香蕉磷脂酶D的纯化与生化特性分析
文献类型: 中文期刊
第一作者: 何雪梅
作者: 何雪梅;唐雅园;孙健;李丽;向昱;杨兆杏;赵承刚;韦珍;唐杰
作者机构:
关键词: 香蕉;磷脂酶D;分离纯化;生化特性
期刊名称: 西南农业学报
ISSN:
年卷期: 2021 年 007 期
页码: 1413-1418
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 【目的】分离纯化香蕉磷脂酶D(PLD)并分析其生化特性,为深入研究香蕉PLD打下基础。【方法】采用硫酸铵沉淀结合柱层析法对香蕉PLD粗酶液进行纯化,考察反应体系中香蕉PLD蛋白含量、Ca2+浓度、pH和反应时间对PLD活性的影响,明确PLD的生化特性。【结果】80%硫酸铵沉淀结合DEAE-sepharose CL-6B阴离子交换柱、Hitrap SP HP阳离子交换柱和Sephadex G-200凝胶层析柱,可将香蕉PLD粗酶液纯化58.74倍,达到电泳纯,香蕉PLD的相对分子量约为43 kD;香蕉PLD活性最佳测定条件为:PLD蛋白含量30.00μg、Ca2+浓度1.20 mmol/L、反应15.00 min、pH 6.5,确定香蕉PLD具有较强亲和力和较高催化活性。【结论】硫酸铵沉淀结合柱层析分离技术适用于香蕉PLD纯化,在PLD蛋白含量30.00μg、Ca2+浓度1.20 mmol/L、反应15.00 min及pH 6.5条件下,香蕉PLD活性最高。
分类号: S668.1
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