抗沙门菌PEG菌毛单克隆抗体的制备及初步临床应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 杨溢

作者： 杨溢;杨玮枫;张东;孟霞;潘夏雨;袁天梅;朱春红;朱国强

作者机构：

关键词： 沙门菌;PegA菌毛;原核表达;MAb;玻板凝集

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2018 年 05 期

页码： 438-442

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为制备抗沙门菌PEG菌毛单克隆抗体(MAb),本研究从鸡白痢沙门菌(CVCC526)基因组中扩增菌毛蛋白基因peg A,将其克隆至原核表达载体pET-22b(+)中构建重组质粒pET-peg A,转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导表达并纯化重组蛋白rPegA。应用该蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,经间接ELISA筛选后获得1株稳定分泌MAb的杂交瘤细胞株,命名为3D12,抗体亚类鉴定其属于IgG1亚类,腹水效价为1∶64 000。通过western blot和玻板凝集试验检测结果显示,该MAb与肠炎沙门菌、鸡白痢沙门菌和鸡伤寒沙门菌呈阳性反应,而与鼠伤寒沙门菌、大肠杆菌CE2、CE7、CE53、DH5α均不发生反应。以PEG菌毛MAb建立玻板凝集方法,检测本实验室临床分离保存的72份禽源沙门菌,同时以商品化沙门菌诊断血清作为平行对照,结果两种方法符合率达97.2%。本研究研制的MAb可用于沙门菌PEG菌毛基础研究和快速检测。

分类号： S852.4

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