A型口蹄疫病毒VP1基因的克隆及原核表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘明

作者： 刘明;刘航;柳纪省

作者机构：

关键词： 口蹄疫病毒;VP1基因;原核表达

期刊名称： 中国农学通报

ISSN： 1000-6850

年卷期： 2012 年 28 卷 14 期

页码： 110-113

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 通过利用原核表达系统表达并纯化出A型口蹄疫病毒VP1蛋白。首先从实验室冻存的含A型口蹄疫病毒的细胞中提取FMDV总RNA,通过RT-PCR获得cDNA。并根据FMDV全基因组序列设计了一对针对VP1基因的引物,通过PCR扩增得到目的基因VP1并亚克隆入pMD 18-T载体。将鉴定出的阳性质粒和表达载体PET32a用BamHⅠ和HindⅢ双酶切回收后连接获得阳性重组质粒PET32-VP1。用IPTG诱导重组质粒表达目的蛋白VP1并用SDS-PAGE进行检测。表达产物用镍亲和树脂进行了纯化。结果证明:A型口蹄疫病毒VP1蛋白在大肠杆菌中获得了高效表达且表达产物得到了纯化,为实验室进一步的研究提供了重要的材料。

分类号： S852.65

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