‘变叶海棠’幼叶cDNA文库构建及CHS基因克隆

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张利义

作者： 张利义;张彩霞;康国栋;田义;王强

作者机构：

关键词： 苹果;cDNA文库;CHS基因;载体构建

期刊名称： 北京农学院学报

ISSN： 1002-3186

年卷期： 2011 年 26 卷 04 期

页码： 11-14

摘要： 为了理解苹果类黄酮代谢的分子机制,以富含类黄酮‘变叶海棠’苹果幼叶为材料,利用SMART法构建一个苹果叶片全长cDNA文库。初级文库滴度为2.28×104 cfu/mL,库容为3.30×106个独立克隆,重组率100%,插入片段平均长度大于1.5kb。并对随机取16个重组子进行测序,经分析完整全长cDNA为7条。并从测序中获得一个查尔酮合酶(Chalcone sythase,CHS)基因,该基因cDNA全长1548bp,有一个1 170bp的开放阅读框,编码含389个氨基酸残基的蛋白,蛋白的理论分子质量为42.44KDa,等电点5.65,该基因与已知苹果CHS基因高度同源。并构建该基因植物表达载体,用冻融法将其导入根癌农杆菌EHA105。

分类号： S661.1

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