文献类型: 中文期刊
第一作者: 胡建和
作者: 胡建和;刘湘涛;张彦和;韩雪清;刘在新;张永国;谢庆阁
作者机构:
关键词: 猪瘟病毒;C-株;全长;cDNA;分子克隆和构建
期刊名称: 畜牧兽医学报
ISSN: 0366-6964
年卷期: 2003 年 34 卷 5 期
页码: 490-493
收录情况: CSCD
摘要: 应用RT-PCR、Nested PCR和Half-nested PCR技术从实验感染感染兔脾组织的总RNA中得到了覆盖猪瘟病毒(CSFV)C-株全基因组的7个cDNA重叠片段,分别克隆于pMD18-T或pGEM-T Easy载体后进行测序。运用T-A克隆和多片段一步连接法,将cDNA重叠片段F1、F2、F3、F4与F5、F6、F7分别克隆到pGEM-5Zf(+)载体后,得到两个半长cDNA亚克隆重组质粒pGEM-5Zf(+)/F1-4和pGEM-5Zf(+)/F5-7,再将两个半长cDNA重叠片段连接并克隆到pGEM-5Zf(+)载体,构建出了CSFV C-株全长cDNA重组质粒pGEM-5Zf(+)/F1-7。全长cDNA的成功构建为进一步研究CSFV分子生物学提供了良好的工具。
分类号:
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