靶向O型口蹄疫病毒shRNA转基因猪体细胞抗病毒活性研究
文献类型: 中文期刊
第一作者: 蔡扩军
作者: 蔡扩军;马铈委;乔军;孟庆玲;陈创夫;黄炯;张再超;杨海波
作者机构:
关键词: shRNA;转基因克隆猪;体细胞;抗病毒活性
期刊名称: 中国预防兽医学报
ISSN: 1008-0589
年卷期: 2013 年 35 卷 01 期
页码: 5-9
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为研究靶向O型口蹄疫病毒(FMDV)VP1基因shRNA转基因猪体细胞的抗病毒活性,本实验在成功培育转基因克隆猪的基础上,通过分离与培养转基因猪体细胞,对其shRNA进行PCR和Southern blot检测,并将FMDV感染体细胞中,通过细胞病变(CPE)、间接免疫荧光试验(IFA)和实时荧光定量PCR(Real-time PCR)分析转基因猪体细胞抗FMDV活性。结果表明,转基因猪体细胞基因组DNA中携带有靶向FMDV VP1基因的shRNA基因片段。与非转基因猪体细胞相比,接种FMDV转基因猪体细胞其出现CPE的时间延迟,细胞内病毒含量显著降低,细胞感染病毒36 h时,对细胞中FMDV VP1基因抑制效率为53.6%。表明该靶向FMDV shRNA转基因克隆猪体细胞在体外具有良好的抗病毒活性。本研究为进一步在体内评价转基因动物的抗病毒活性奠定了基础。
分类号: S852.65
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