牛传染性鼻气管炎病毒SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法的建立及应用
文献类型: 中文期刊
第一作者: 任亚初
作者: 任亚初;楚会萌;程凯慧;解晓莉;张亮;孙阳阳;杨美;杨宏军;唐月新;刘文浩;李开荣
作者机构:
关键词: 牛传染性鼻气管炎;荧光定量PCR;gD基因;诊断
期刊名称: 中国预防兽医学报
ISSN: 1008-0589
年卷期: 2019 年 41 卷 010 期
页码: 1032-1036
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为快速定量检测牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV),本研究根据IBRV的gD基因保守序列,设计合成一对特异性引物,建立了能够快速检测IBRV的SYBRGreenⅠ荧光定量PCR方法.特异性试验结果显示,该方法与引起牛消化道和呼吸道疾病的其它几种病毒均无交叉反应,特异性较强;敏感性试验结果显示,该方法对质粒标准品的最低检出限达6.1×101拷贝/μL,敏感性较高且高于普通PCR方法;重复性实验结果显示,批内、批间变异系数均小于3.0%,重复性良好.利用该方法检测了3个规模化奶牛场送检的47份奶牛鼻拭子样品,结果显示检出了12份阳性样品,与常规PCR检测方法的相比,总符合率为97.87%.本研究建立的检测IBRV的SYBRGreenⅠ荧光定量PCR方法准确可靠,为IBRV的早期快速检测和定量分析提供了技术支撑.
分类号: S852.65
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