马铃薯纺锤块茎类病毒山西分离物侵染性克隆的构建

文献类型： 中文期刊

第一作者： 白云凤

作者： 白云凤;闫建俊;张耀;张忠梁;冯瑞云;张维锋

作者机构：

关键词： 马铃薯纺锤块茎类病毒;山西分离物;序列分析;体外转录;侵染性克隆

期刊名称： 山西农业科学

ISSN： 1002-2481

年卷期： 2012 年 40 卷 07 期

页码： 701-704

摘要： 马铃薯纺锤块茎类病毒(Potato spindle tuber viriod,PSTVd)侵染马铃薯会严重影响薯块的产量和品质。根据PSTVd的同源序列设计引物,以山西省马铃薯感病块茎中提取的总RNA为模板,经RT-PCR方法扩增出全长cDNA片段,将其克隆到质粒pBS-T载体上,进行序列分析。结果表明,该类病毒全长359 nt,能通过分子内序列互补形成致密的二级结构。以该序列作为种子序列进行Blast搜索,该序列与PSTVd荷兰分离物(GenBank登陆号:AY372400.1)的序列一致性为100%。将该序列与东北株系、河北株系及已公布的弱株系(GenBank登陆号:M14814.1)、强株系(GenBank登陆号:U23058.1)、中间株系(GenBank登陆号:AY937179.1)比对,有12个核苷酸具有多态性,其中有5个发生在致病区。将线性化的质粒pBS-PSTVd及其PSTVd的体外转录产物接种番茄矮红宝的无毒苗,20 d后接种株轻微显症,RT-PCR检测均呈阳性。将RT-PCR产物测序,其结果与接种的PSTVd原序列完全一致,证实构建的PSTVd山西分离物的克隆具有侵染性。

分类号： S435.32

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