关于细菌人工染色体(BAC)文库载体DNA制备的研究

文献类型: 中文期刊

第一作者: 姜涛

作者: 姜涛;刘越;孔秀英;贾继增

作者机构:

关键词: 细菌人工染色体(BAC);载体DNA;酶切;脱磷;凝胶回收纯化

期刊名称: 遗传学报

ISSN: 0379-4172

年卷期: 2002 年 29 卷 12 期

页码: 1126-1131

收录情况: SCI ; 北大核心 ; CSCD

摘要: 细菌人工染色体 (BAC)文库在基因组研究中起着关键作用。构建BAC文库的一个关键步骤就是BAC载体DNA的制备。制备高质量的BAC载体DNA受到包括酶切、脱磷等诸多因素的影响。以BAC载体pECBAC1为材料 ,分别采用限制性内切酶BamHⅠ和HK脱磷酶对其进行酶切和脱磷 ,并结合凝胶回收纯化技术 ,制备了可用于进一步构建BAC文库的线性载体DNA。并在此基础上 ,确定了制备BAC载体DNA的适宜条件 ,其中包括确定适宜限制内切酶用量及酶切时间 ,脱磷酶种类及浓度和凝胶回收纯化线性载体DNA等关键步骤。

分类号: Q78

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