小反刍兽疫病毒基因组全长cDNA的构建及其序列的测定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 翟军军

作者： 翟军军;窦永喜;张海瑞;毛立;蒙学莲;骆学农;才学鹏

作者机构：

关键词： 小反刍兽疫病毒;RT-PCR;全长cDNA克隆;分子克隆

期刊名称： 病毒学报

ISSN： 1000-8721

年卷期： 2010 年 26 卷 04 期

页码： 55-61

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据小反刍兽疫Nigeria75/1株全基因组序列设计并合成PPRV特异引物,进而应用RT-PCR技术分5段扩增了PPRV全基因组cDNA。将扩增的各个cDNA重叠片段JF1、JF2、JF3、JF4和JF5分别克隆到载体上,建立了PPRV的初级cDNA克隆。在扩增5′末端时,引入AscI酶切位点和T7启动子序列;在基因组3′末段引入PacI酶切位点,后者供cDNA模板的线性化之用。将扩增片段再依次连接,最后亚克隆到质粒pok12中,获得了PPRV全长基因组cDNA克隆pok12-PPRV。通过序列同源性和进化树分析,结果表明,Nigeria75/1与MV和RPV的遗传关系最近。Nigeria75/1株全长cDNA的序列测定及构建,为拯救PPRV和在分子水平进一步深入研究PPRV打下坚实的基础。

分类号： S852.659.5

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