中国猪瘟C-株(脾淋毒)全长cDNA的分子克隆

文献类型: 中文期刊

第一作者: 胡建和

作者: 胡建和;刘湘涛;张彦明;韩雪清;刘在新;张永国;谢庆阁

作者机构:

关键词: 猪瘟病毒;C株;全长cDNA;分子克隆和构建

期刊名称: 畜牧兽医学报

ISSN: 0366-6964

年卷期: 2003 年 34 卷 05 期

页码: 490-493

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 应用RT PCR、NestedPCR和Half nestedPCR技术从实验感染兔脾组织的总RNA中得到了覆盖猪瘟病毒(CSFV)C 株全基因组的7个cDNA重叠片段,分别克隆于pMD18 T或pGEM TEasy载体后进行测序。运用T A克隆和多片段一步连接法,将cDNA重叠片段F1、F2、F3、F4与F5、F6、F7分别克隆到pGEM 5Zf(+)载体后,得到两个半长cDNA亚克隆重组质粒pGEM 5Zf(+)/F1 4和pGEM 5Zf(+)/F5 7,再将两个半长cDNA重叠片段连接并克隆到pGEM 5Zf(+)载体,构建出了CSFVC 株全长cDNA重组质粒pGEM 5Zf(+)/F1 7。全长cDNA的成功构建为进一步研究CSFV分子生物学提供了良好的工具。

分类号: S852.65

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