体外靶向筛选小鼠精子特异性PRSS37基因最适siRNA

文献类型： 中文期刊

第一作者： 高斯

作者： 高斯;赵萍;刘晓雅;方桂杰;任红艳;毕延震

作者机构：

关键词： 丝氨酸蛋白酶37;表达载体;异位表达;siRNA;共转染;干扰效率

期刊名称： 生物技术

ISSN： 1004-311X

年卷期： 2025 年 35 卷 001 期

页码： 20-24

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： [目的]细胞水平靶向筛选出小鼠精子特异性PRSS37基因的最适siRNA序列。[方法]构建PRSS37过表达载体pcDNA3.1-Kozak-3×Flag-PRSS37,并将其转染至GC-2细胞，通过Western Blot检测PRSS37的异位表达。基于PRSS37序列设计并合成3对siRNA序列，将PRSS37过表达载体和siRNA共转染于GC-2细胞，实时荧光定量PCR检测siRNA对PRSS37干扰效率，筛选最有效的siRNA。[结果]PRSS37过表达载体在GC-2细胞中成功表达，与对照组相比，实验组中PRSS37蛋白表达显著升高；设计合成的3对siRNA均能有效干扰PRSS37的表达，与未干扰组相比差异显著(P<0.05),其中siRNA-1干扰效率最高，干扰效率约为63%。[结论]成功实现了PRSS37在GC-2细胞中的异位表达，并在细胞水平筛选出小鼠PRSS37最适siRNA序列。

分类号： Q78

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