实时荧光定量PCR检测RAW264.7巨噬细胞中Th1/Th2型细胞因子转录水平方法的建立及初步应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 单雪芹

作者： 单雪芹;韩先干;张敏;宋军;刘海文;田明星;潘玲;丁铲;周锦萍;于圣青

作者机构：

关键词： Th1/Th2型细胞因子;巨噬细胞RAW264.7;实时荧光定量PCR;布鲁氏菌

期刊名称： 细胞与分子免疫学杂志

ISSN： 1007-8738

年卷期： 2013 年 29 卷 004 期

页码： 430-433

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的建立小鼠RAW264.7巨噬细胞的Th1和Th2型细胞因子荧光定量PCR检测方法.方法依据GenBank中小鼠的β-actin基因序列、Th1型及Th2型细胞因子的核苷酸序列设计特异性引物,以RAW264.7巨噬细胞mRNA反转录后的cDNA为模板,通过构建质粒阳性标准品,建立检测上述细胞因子转录水平的real-time PCR方法.结果用建立的荧光定量PCR方法,检测牛型布鲁氏菌S2308株感染RAW264.7巨噬细胞后,巨噬细胞Th1和Th2型细胞因子的转录水平.最低检测量为102拷贝/μL,线性关系很好,R2≥0.982,该方法具有良好的特异性和重复性.结论成功建立了检测巨噬细胞中Th1和Th2型细胞因子转录水平的荧光定量PCR方法.

分类号： R392.11

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