利用不同实时定量PCR方法分析相对基因表达差异

文献类型: 中文期刊

第一作者: 余舜武

作者: 余舜武;刘鸿艳;罗利军

作者机构:

关键词: 相对定量;标准曲线;实时荧光定量PCR;OsRDB1

期刊名称: 作物学报

ISSN: 0496-3490

年卷期: 2007 年 33 卷 07 期

页码: 1214-1218

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 利用实时荧光定量PCR方法分析目标基因转录本之间的表达差异,目前常用的分析实验数据的有绝对定量和相对定量方法。为了克服绝对定量方法的繁琐和简化相对定量的分析方法,分别利用2-ΔΔCt、2-ΔCt和标准曲线法对水稻OsRDB1基因在不同化学试剂和激素处理下的表达差异进行了分析,发现2-ΔΔCt必须引入标准的看家基因作为参考,计算方法繁琐,计算结果受扩增效率影响;而利用2-ΔCt和标准曲线法计算方便,节省定量PCR试剂,但其结果易受到RNA浓度测量准确率的影响,其中标准曲线法引入斜率消除扩增效率的影响,最能测得实际的原始拷贝数差异。

分类号: S188

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