尼罗罗非鱼TRAF4基因的克隆、表达及功能分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 韩雪晴

作者： 韩雪晴;高风英;卢迈新;刘志刚;曹建萌;王淼;衣萌萌;张德锋

作者机构：

关键词： 肿瘤坏死因子受体相关因子4基因(TRAF4);尼罗罗非鱼;基因表达;转染

期刊名称： 农业生物技术学报

ISSN： 1674-7968

年卷期： 2019 年 03 期

页码： 381-392

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 肿瘤坏死因子受体相关因子4 (tumor necrosis factor receptor associated factors 4, TRAF4)是TRAFs家族中比较特殊的一员,生物学功能较多且较复杂。为了明确TRAF4基因在尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)免疫过程中的作用,本研究首先通过反转录PCR和分段扩增获得尼罗罗非鱼TRAF4基因c DNA (GenBank No. MH986338)及基因组序列,并进行基因和蛋白质结构等生物信息学分析;然后利用qRT-PCR技术检测该基因在健康个体中的组织表达、受精后不同发育阶段的表达以及人工感染无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)后的表达特征;最后构建重组真核表达载体,分析TRAF4在人胚肾细胞293T中的亚细胞定位及其在Nuclear factorκB (NF-κB)通路中的作用。结果显示,TRAF4基因的cDNA序列为4 483 bp,开放阅读框为1 413 bp,可编码470个氨基酸。基因组序列分析发现,TRAF4基因含7个外显子和6个内含子。氨基酸序列分析发现,TRAF4存在1个环指(RING-finger)结构域、3个TRAF类型的锌指(zinc-finger)结构域、1个甲基多巴和TRAF同源物(meprin and TRAF-homology, MATH)结构域。组织分析表明,TRAF4基因在所检测的11个组织/器官中均有表达,脑中表达最高,脾中表达最低;该基因在受精后不同发育阶段均有表达。人工感染无乳链球菌后,尼罗罗非鱼TRAF4基因在肠、鳃、脾、肾和血液中的表达量均发生不同程度的变化,在鳃和血液中显著升高,在肠和肾中的表达量均低于对照组(0 h组)。亚细胞定位和双荧光素酶报告分析显示,TRAF4在293T细胞中主要定位于细胞质,可增强NF-κB活性。综上所述,TRAF4基因在尼罗罗非鱼的免疫应答中发挥重要作用,本研究为深入探讨TRAF4基因在罗非鱼抗感染免疫中的作用机制提供了基础资料。

分类号： S917.4

  • 相关文献

[1]尼罗罗非鱼绿色荧光蛋白/GH融合表达载体的构建及其在NIH293T细胞中的表达. 王茂元,张平,邹芝英,李大宇,杨弘. 2011

[2]杂交鳢CmaZAP-70基因的克隆、表达及其功能分析. 刘付翠,赵飞,谭爱萍,孔璐璐,何山,张瑞泉,邓玉婷,姜兰. 2019

[3]低温胁迫对尼罗罗非鱼水通道蛋白基因(AQP1)表达的影响. 朱华平,刘玉姣,刘志刚,卢迈新,高风英,可小丽,黄樟翰. 2014

[4]两种方法研究不同茎部长度串联shRNA表达载体对EGFP基因的干扰效应. 肖红卫,刘中华,刘西梅,郑新民,乔宪凤,李莉. 2010

[5]鸡白细胞介素2(IL-2)DNA-壳聚糖纳米粒的制备及体外转染. 张文龙,殷喆,刘霓红,杨涛,刘胜旺,步志高,王君伟,吴东来. 2009

[6]纳米基因载体研究进展. 卢艳敏. 2013

[7]日本乙型脑炎病毒NS3蛋白的真核表达及鉴定. 王双双,赵红梅,周丹娜,蔡行,耿超. 2019

[8]脂质体法转染水牛肾脏成纤维细胞条件的优化. 邓廷贤,庞春英,张滢寅,杨炳壮,张秀芳,梁贤威. 2013

[9]猪瘟病毒兔化弱毒株全长cDNA克隆的感染性鉴定. 胡建和,刘湘涛,郭东升,张淼涛,田宏,张彦明,谢庆阁. 2004

[10]绿色荧光蛋白基因在山羊胎儿成纤维细胞中的表达. 楚秋霞,王二耀,吴姣,陈付英,王治方,辛晓玲,施巧婷,冯亚杰,李文军,魏成斌,徐照学. 2013

[11]DNA疫苗免疫增强技术的比较研究. 曾伟伟,石星明,王云峰,王玫,黄婷婷,高宏博. 2008

[12]脂质体介导pAcGFP-bFADD重组质粒转染Hela细胞条件的优化. 杨润军,李武峰,张路培,许尚忠,李俊雅,高雪,陈金宝. 2009

[13]小反刍兽疫病毒F基因真核载体的构建与表达. 朱学亮,张强,杨帆,窦永喜,骆学农,岳城,才学鹏. 2009

[14]HIV包膜蛋白Gp120在果蝇Schneider 2细胞内的表达纯化及初步性质鉴定. 孙佩龙,周建华,吕淑霞,刘新奇. 2010

[15]用Lipofectin Reagent转染猪子宫上皮细胞. 吴惠贤. 1993

[16]脂质体介导转染法原理及其研究近展. 周雪雁,关伟军. 2004

[17]小鼠白血病抑制因子基因的克隆、表达及其对维持鸡原始生殖细胞未分化状态的影响. 杨娜娜,朱靖,史卫峰,孟春花,杜立新. 2008

[18]pSecTag-EGFP真核表达载体的构建及其转染鸡胚胎成纤维细胞条件的优化. 杨娜娜,史卫峰,崔英杰,赵晓民,杜立新. 2007

[19]猪带绦虫AgB与猪CD58或IFN-γ共表达质粒的构建及其在BHK-21细胞中的表达. 侯俊玲,景志忠,郑亚东,胡志敏,骆学农,蒙学莲,窦永喜,刘军龙,才学鹏. 2007

[20]山羊痘病毒温度敏感株基因组DNA复制非必需区的筛选. 施程洪,张强,吴国华,颜新敏,鞠厚斌,李健,朱海霞,朱彩珠,谢芳,韩若婵,才学鹏. 2007

作者其他论文 更多>>

微信小程序