棉花肉桂醇脱氢酶基因GhCAD3的克隆及原核表达

文献类型: 中文期刊

第一作者: 倪志勇

作者: 倪志勇;李波;范玲

作者机构:

关键词: 棉花;肉桂醇脱氢酶;基因克隆;原核表达

期刊名称: 核农学报

ISSN: 1000-8551

年卷期: 2010 年 24 卷 05 期

页码: 46-52+57

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 肉桂醇脱氢酶(CAD)是木质素生物合成过程中的一个关键酶类。本研究从棉花中克隆了一个CAD基因,命名为GhCAD3(GenBank登录号为FJ376601)。GhCAD3全长1573 bp,具有1个1080 bp的开放阅读框,5′非编码区为35 bp,3′非编码区为458 bp,编码359个氨基酸,预测分子量约为39.116kD,等电点为7.48。氨基酸同源性分析发现,GhCAD3与其他CAD一致性为64.13%。为了进一步研究GhCAD3基因的功能,构建了该基因的原核表达载体pET-28a-CAD3,经酶切鉴定后转化到大肠杆菌BL21(DE3)中。SDS-PAGE电泳分析表明,最佳诱导表达条件为0.5 mmol/L IPTG在37℃下诱导7 h。

分类号: S562

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